学文网摘要：目的 探讨我院鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药性及耐药基因情况。方法 对我院2012年11月～2013年5月临床痰标本分离到的40株鲍曼不动杆菌，使用全自动鉴定及药敏系统进行鉴定和药敏试验。用PCR技术检测从ICU病房分离的26株鲍曼不动杆菌耐药基因OXA-23、OXA-24、OXA-58、IMP、VIM、SIM、NDM-1、OXA-51。结果 40株鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦、多粘菌素B、米诺环素有较高敏感率，对亚胺培南和美罗培南耐药率达50%，对其余10种抗生素耐药率均超过70%。ICU病房分离的26株鲍曼不动杆菌均检出OXA-51，19株检出OXA-23。结论 鲍曼不动杆菌耐药性强，特别是ICU病房的分离株。OXA-23型基因是我院ICU鲍曼不动杆菌对碳氢酶烯类抗菌药物耐药的主要原因。
关键词：鲍曼不动杆菌；耐药性；耐药基因
鲍曼不动杆菌为医院获得性感染的主要病原菌之一，在我国其临床分离率位居革兰阴性非发酵菌的首位[1]。它常常引起院内获得性肺部感染、尿路感染、皮肤及软组织感染和血流感染等[2]。本文对我院分离出的鲍曼不动杆菌耐药性进行统计分析，并对ICU分离株进行耐药基因检测。
1资料与方法
1.1一般资料 2012年11月～2013年5月我院临床痰标本分离出的鲍曼不动杆菌40株。
1.2仪器 全自动细菌鉴定药敏仪，珠海迪尔公司；PTC-200 PCR扩增仪及Gel Doc XR+凝胶成像分析系统，美国Bio-Rad公司；SAV-570电泳仪，美国Savant公司。
1.3试剂 全自动细菌鉴定药敏试剂，珠海迪尔公司；PCR反应体系和DNA maker DM2000，北京康为世纪生物科技公司；核酸染料Goldview，赛百盛公司；MO Bio UltraClean微生物DNA提取试剂盒，法国梅里埃公司。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，铜绿假单胞菌ATCC27853，购自卫生部临检中心。
1.4细菌鉴定及药敏试验 用全自动细菌鉴定药敏仪进行细菌鉴定及药敏试验。药敏结果判断和解释参照CLSI2012年抗菌药物敏感试验执行标准。
1.5 PCR检测耐药基因 从Gen Bank中获得鲍曼不动杆菌基因OXA-23、OXA-24、OXA-58、OXA-51、IMP、VIM、SIM和NDM-1，参照文献[3]设计引物序列，见表1。由上海英骏公司合成。用煮沸法提取模板DNA。各靶基因PCR扩增体系为20ul，包括2xTaq MasterMix 10ul，ddH2O6ul，10umol/L上、下游引物各1ul，模板2ul。扩增参数：94℃预变性3min。94℃变性1min，IMP、VIM退火温度55℃，SIM、NDM-1、OXA-51退火温度58℃，OXA-23退火温度60℃，OXA-24退火温度45℃，OXA-58退火温度53℃，退火时间均为30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃6min。扩增产物行10g/L琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像分析系统成像。
2结果
2.1 40株鲍曼不动杆菌在不同科室的分布 ICU病房占65%，神经外科占15%，呼吸内科占7.5%，心血管内科占5%，内分泌科占5%，儿科占2.5%。
2.2 ICU病区26株鲍曼不动杆菌耐药基因检测结果 26株均检出OXA-51，19株检出OXA-23，OXA-24、OXA-58、IMP、VIM、SIM和NDM-1耐药基因均未检出。
2.3 40株鲍曼不动杆菌对15种抗菌药物的药敏试验结果 见表2。
3讨论
本实验结果表明，鲍曼不动杆菌呈现高度多重耐药，特别是ICU分离株。鲍曼不动杆菌对头孢类耐药率高达92%，对喹诺酮和氨基糖甙类耐药率达80%，对碳氢酶烯类耐药率50%，与2013年中国CHINT细菌耐药性监测公布的数据接近[4]。其原因主要为：①细菌耐药性基因自发性突变；②抗菌药物选择造成的环境压力，使耐药基因不断的遗传和传播；③手卫生的执行率低，导致耐药基因的相互传播。多重耐药鲍曼不动杆菌临床感染科室主要为ICU、神经外科和呼吸内科，主要是因为这些科室患者病情较重，且大部分有侵袭性插管、住院时间长、长期卧床、长期使用激素和免***抑制剂等使患者抵抗力下降，在一定程度上造成多重耐药鲍曼不动杆菌的定植与传播。长期大剂量使用抗生素也诱导了耐药菌的产生。鲍曼不动杆菌的耐药情况与抗菌药物的使用率、总使用强度、β内酰胺类药物和喹诺酮类药物的使用强度呈正相关[5]。
从ICU病房分离到的26株药鲍曼不动杆菌均检出携带OX-51基因，19株检出重要耐药基因OXA-23。OXA-51基因高表达与ISAbal有关，导致对碳青霉烯类产生耐药[6]。重视院内感染的监测，加强环境消毒，减少接触性传播，分组隔离已感染患者是控制多重耐药菌的有效措施。
参考文献：
[1]胡付品，妹，汪复，等.2013年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志。2014，14（5）：365-374.
[2]吴丽丽，王贺永，郑瑞娟，等.多重耐药鲍曼不动杆菌临床分布与耐药性分析[J].河北医药。2014，36（19）：3006-3007.
[3]钟敏，黄文芳，刘华，等.多重耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯耐药基因和同源性分析[J].临床检验杂志。2012，30（5）：367-370.
[4]胡付品，妹，汪复，等.2013年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志。2014，14（5）：365-374.
[5]许弄章，金忠华.鲍曼不动杆菌耐药率与抗菌药物使用情况的相关性分析[J].中国全科医学，2013，16（10）：3391-3393.
[6]张琼.泛耐药鲍曼不动杆菌耐药机制研究进展[J].中国医药导报，2012，9（8）：13-14.
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