学文网三氯新（DP300）是瑞士汽巴－嘉基公司于20世纪60年代开发推广的广谱抗微生物药剂，现广泛应用于化妆品、洗涤剂和医疗卫生等行业。我国“化妆品卫生规范”规定DP300在化妆品防腐剂限量为0.3％，在皮肤、黏膜消毒剂中，DP300的含量限值也定为0.3％。自限量实施以来，对消费者的安全和健康起了重要作用。至今未见DP300对皮肤刺激的系统研究资料。为此，本研究目的为皮肤消毒剂中DP300含量限值修改提供科学依据。
1材料与方法
1.1材料
橄榄油（南京欧乐富贸易有限公司产品）；吐温－80［药准字（94第0099号－186）批号：981108，上海申宇医药有限公司产品］；丙二醇（分析纯 XK13－2010282021Ц，上海化学试剂公司产品）；乙醇（分析纯XK13－201－00239，苏州市振兴化工厂产品）；十二烷基硫酸钠（SDS上海光铧科技有限公司产品）。
三氯新（2.4.4′－三氯－2′－羟二苯醚，DP300），为具有芳香的白色粉末，微溶于水，熔点55～60℃，具有较高的热稳定性，纯度>99％，由瑞士汽巴－嘉基公司提供。
实验动物选用健康无皮肤疾病，体重2.0～3.0 kg新西兰家兔，合格证号：02-52-1，由复旦大学实验动物部提供。家兔饲料由苏杭实验动物科技发展公司提供，合格证号：9905084。动物饲养环境温度为（23±3）℃，相对湿度为40％～70％。家兔自由取食，饮用水水质符合我国GB5749《生活饮用水的卫生标准》要求［1］。
1.2方法
试验前24 h动物背部脊柱两侧去毛，面积为3 cm×3 cm。[LL]第2天，在左侧完好去毛皮肤上划出2.5cm×2.5cm试验区，分
别以橄榄油、吐温－80、83％丙二醇、70％乙醇及0.5％SDS配制成试验所需浓度的DP3000.5mL均匀涂在试验区皮肤上，并用二层纱布和一层玻璃纸覆盖，再用无刺激胶布固定，使受试物与皮肤直接接触4 h，右侧去毛皮肤作溶剂对照。试验结束后除去覆盖物，并用温水清洗除去残留受试物后，于1、24 和48h观察试验部位皮肤变化［2］。
2结果
由表1可见，DP300橄榄油溶液对家兔皮肤的刺激阈浓度>20％；DP300的吐温－80溶液对家兔皮肤的刺激阈浓度>50％；DP300用吐温－80作***化剂（ 吐温80∶水＝78∶22），加水配制成的***化液对家兔皮肤的刺激阈浓度>50%；用83％丙二醇水溶液作溶剂，15％DP300对家兔皮肤无刺激，而20％ DP300对家兔皮肤有轻度刺激，50％DP300从积分均值看属轻刺激，但4 d后部分动物局部皮肤增厚，缺少弹性；20％ DP300及其溶剂70％乙醇对家兔皮肤均有轻度刺激作用，但从其积分均值看，20％DP300组明显高于乙醇对照组，其增加量与DP300的作用有一定关系；1％SDS水溶液对家兔皮肤的毒理学刺激阈浓度约为1％，鉴于0.5％～1％ SDS水溶液对DP300的溶解能力均已能达到试验要求，故选用尽可能低的浓度（0.5％）作DP300溶剂，以减少溶剂对DP300皮肤刺激性的干扰；用0.5％SDS水溶液作溶剂，DP300的刺激阈浓度为4％，最大无刺激浓度约为2.5％。20％ DP300观察，96 h时有皮肤增厚，个别动物出现结痂。
DP300对实验动物皮肤的刺激作用与所用的溶剂有关；橄榄油、吐温－80、优于其它溶剂，1％SDS最差。以上配制方法均将DP300用研钵磨研后，加入适量的溶剂在70～80℃的水浴中加热并搅拌溶解，配制成试验所需浓度，缓慢冷却至30℃左右再进行皮肤刺激试验(表1)。
3讨论
皮肤是一个复杂的器官，既有外胚层来源，也有中胚层来源。皮肤是与外界环境直接接触的外露器官，具有重要的保护作用；皮肤内有丰富的感觉神经末稍，成为人体的一个广大的感受面。皮肤对调节体温和排出废物有一定的作用［3］。不同的动物皮肤通透性也不同，例如：大白鼠及兔的皮肤较猫的皮肤通透性强；豚鼠皮肤的通透性与人相似。毒物可以通过皮肤直接吸收，在经过表皮屏障后，自由地经过毛细血管进入血液循环；也可直接通过皮脂腺和毛囊壁进入真皮，不经过表皮屏障而吸收。充分说明了毒物经过皮肤进入血液循环有不同的方式［4］。
皮肤对毒物的吸收与毒物的溶剂有一定的关系，凡是对脂肪、水均溶的物质，可被皮肤迅速吸收，速度与口服或皮下注射几乎相等。溶于脂而微溶于水的物质，皮肤吸收的速度缓慢且量少。
本次研究以家兔为实验对象，用吐温－80作溶剂，DP300对家兔皮肤刺激阈浓度>50％；用橄榄油作溶剂DP300对家兔皮肤刺激阈浓度>20％；用0.5％SDS作溶剂，DP300的皮肤刺激阈浓度为4％。从上述实验结果可清楚地看出，DP300对实验动物皮肤的刺激作用更多的取决于所用的溶剂，其中橄榄油和吐温－80明显优于其它溶剂，而0.5％SDS为溶剂的DP300溶液对皮肤刺激作用阈较低。因此，在实际使用过程中，要避免DP300对皮肤刺激作用的发生，选择合适的溶剂或助溶剂是关键。
4参考文献
［1］方喜业.医学实验动物学［M］.北京：人民卫生出版社，1995，131-137.
［2］卫生部.消毒技术规范2002版［S］.129-131.
［3］何泽勇. 组织学与胚胎学［M］.北京：人民卫生出版社，1983，128-131.
［4］朱蓓蕾.动物毒理学［M］.上海：上海科技出版社，1987，13-17.
(收稿日期：2007-04-16)
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