学文网化学发光篇1
1.1主要仪器与试剂LB962型化学发光分析仪
（德国伯托公司）；白色96孔板（美国康宁公司）。鲁米诺（Sigma-aldrich公司）；8-羟基喹啉（Sig－ma-aldrich公司）；FeCl3（Sigma-aldrich公司）；过氧化氢（30%，Sigma-aldrich公司）；ATP生物发光检测试剂盒（ENLITEN，美国普洛麦格公司）；实验用水均为经Milli-Q（Millipore公司）纯化的超纯去离子水。实验中所用试剂均为分析纯。
1.2实验方法
1.2.1储备液的配制
鲁米诺储备溶液：称取一定量的鲁米诺溶于1mol/L的NaOH溶液中，配制成1×10-2mol/L的鲁米诺储备液，储存在棕色瓶中，避光4℃保存。8-羟基喹啉储备溶液：称取一定量的8-羟基喹啉溶于0.1mol/L的HCl溶液中，配制成1×10-2mol/L的8-羟基喹啉储备液，4℃保存。Fe（III）标准储备溶液：称取一定量的烘干恒重的FeCl3溶于pH2.5的HCl溶液中，配制成1×10-3mol/L的Fe（III）标准储备溶液，其摩尔浓度通过硫代硫酸钠滴定法准确确定，通过GBW(E)081235硫代硫酸钠滴定溶液标准物质进行溯源。ATP标准储备溶液：称取一定量的ATP标准物质候选物溶于无ATP水（ATP生物发光检测试剂盒自带）中，配制成1×10-7mol/L的ATP标准储备液，-20℃保存。作为实验室研制的标准物质候选物，需要按照ISO导则35要求，摩尔浓度经过8家单位联合验证，并经过一系列均匀性、稳定性的考查。
1.2.2工作溶液的配制
鲁米诺工作溶液：用纯水将鲁米诺储备液稀释成1×10-3mol/L的鲁米诺工作溶液（其中NaOH的摩尔浓度为0.1mol/L）。8-羟基喹啉工作溶液：用纯水将8-羟基喹啉储备溶液稀释成1×10-3mol/L的8-羟基喹啉工作液（其中HCl的摩尔浓度为0.01mol/L）。Fe（III）标准工作溶液：用pH2.5的HCl溶液将Fe（III）标准储备溶液逐级稀释成Fe（III）标准工作溶液（1×10-4mol/L，3×10-5mol/L，1×10-5mol/L，3×10-6mol/L，1×10-6mol/L）。过氧化氢溶液：取一定量体积分数为30%的过氧化氢，用水稀释至1%，用时现配。ATP标准工作溶液：用检测缓冲液（ATP生物发光检测试剂盒自带）将ATP标准储备溶液逐级稀释成ATP标准工作溶液（1×10-8mol/L，1×10-9mol/L、1×10-10mol/L，1×10-11mol/L），现用现配。
1.2.3实验方法
1）化学发光标准体系的建立
化学发光反应动力学检测：在1.5mL离心管中分别依次加入以下溶液，立刻将该离心管放到化学发光分析仪中，进行动力学检测，每秒取一个点，检测时间共100s。①10μL鲁米诺工作溶液、100μL过氧化氢溶液、10μLpH2.5的HCl溶液（相当于10μLFe（III）标准工作溶液）、85μLpH2.0的HCl溶液（相当于85μL8-羟基喹啉工作溶液）；②10μL鲁米诺工作溶液、100μL过氧化氢溶液、10μLFe（III）标准工作溶液（3×10-5mol/L）、85μLpH2.0的HCl溶液（相当于85μL8-羟基喹啉工作溶液）；③10μL鲁米诺工作溶液、100μL过氧化氢溶液、10μLpH2.5的HCl溶液（相当于10μLFe（III）标准工作溶液）、85μL8-羟基喹啉工作溶液；④10μL鲁米诺工作溶液、100μL过氧化氢溶液、10μLFe（III）标准工作溶液（3×10-5mol/L）、85μL的8-羟基喹啉工作溶液。8-羟基喹啉的用量对体系发光值稳定性的影响：在10μL鲁米诺工作溶液、100μL过氧化氢溶液、10μLFe（III）标准工作溶液（3×10-5mol/L）中分别加入不同体积的8-羟基喹啉工作溶液，并用pH2.0的HCl溶液将体系补足205μL，立即检测当前发光值。pH对体系发光值稳定性的影响：在1.5mL离心管中依次加入10μL鲁米诺工作溶液、100μL过氧化氢溶液、10μLFe（III）标准工作溶液（3×10-5mol/L）、85μL的8-羟基喹啉工作溶液，利用HCl或NaOH调整体系的pH值，立刻将该离心管放到化学发光分析仪中检测当前发光值。反应介质对体系发光值稳定性的影响：在1.5mL离心管中分别加入50μL的Tris-HCl、H3BO3-KOH、Na2CO3-NaHCO3和B-R缓冲溶液，然后分别依次加入10μL鲁米诺工作溶液、100μL过氧化氢溶液、10μLFe（III）标准工作溶液（3×10-5mol/L）、85μL的8-羟基喹啉工作溶液，立刻将该离心管放到化学发光分析仪中检测当前发光值。
2）生物发光标准体系的建立
用ATP标准物质代替ATP生物发光检测试剂盒中的ATP校准溶液，采用试剂盒中的其他溶液建立生物发光标准体系：首先，将10μL检测缓冲液加入有100μL荧光素/荧光素酶试剂的1.5mL离心管中，立刻将该离心管放到化学发光分析仪中进行检测，作为背景信号；然后，将10μLATP标准工作溶液加入有100μL荧光素/荧光素酶试剂的1.5mL离心管中，立刻将该离心管放到化学发光分析仪中进行检测。
2结果与讨论
2.1化学发光标准体系的建立
鲁米诺（3-氨基邻苯二甲酰肼）是最常见的化学发光试剂之一，具有发光效率高、结构简单、容易合成、水溶性好等优点；在碱性条件下，鲁米诺被氧化剂（如过氧化氢）氧化后能发出波长425nm的蓝光。在不同体系中，鲁米诺发光形式不同：金属离子-过氧化氢-鲁米诺体系是闪光型发光；辣根过氧化物酶（HRP）-过氧化氢-鲁米诺体系[9-10]是辉光型发光。HRP-鲁米诺体系虽是辉光型发光，但生物酶的活性很难控制和复现，不适用于仪器的计量校准。本文将8-羟基喹啉（8-Ox）引入鲁米诺-过氧化氢-金属离子体系中，实现发光方式由闪光型到辉光型的转变，建立了发光强度稳定的鲁米诺-过氧化氢-铁（III）-8-羟基喹啉化学发光标准体系。
2.1.1添加8-羟基喹啉
初步实现稳定辉光型信号鲁米诺在碱性溶液中，与OH-反应生成阴离子，该阴离子被某些氧化剂氧化产生氨基邻苯二甲酸根离子，氧化过程中产生的化学能被氨基邻苯二甲酸根离子吸收，使其处于激发态，回到基态时发出波长为425nm的光，Fe（III）可以催化该反应过程，增强化学发光信号，而8-羟基喹啉可以与Fe（III）络合，从而起到稳定剂的作用。不同体系中鲁米诺-H2O2的发光情况，其纵坐标为相对发光强度（RLU）。曲线a说明鲁米诺与H2O2混合后，被H2O2氧化并发光，刚开始发光值缓慢上升，随着反应物的消耗，发光值开始缓慢下降，发光形式呈现一个较平缓的闪光；曲线b说明在鲁米诺-H2O2体系中加入了Fe（III）之后，加速了鲁米诺与H2O2反应，因此一开始体系的发光就达到了最大值，之后随着反应物的快速消耗，发光值也急速下降；曲线c说明当在这个体系中加入8-羟基喹啉，Fe（III）与其络合，保证了在碱性条件下Fe（III）的稳定性，使化学发光反应变成非常平稳的辉光型，在100s内发光值的相对标准偏差仅为1.1%。曲线d是没有Fe（III）的空白对照实验。
2.1.2优化反应体系的稳定性
为获得稳定且容易操作的化学发光反应体系，选择了10μL鲁米诺工作溶液（摩尔浓度为1×10-3mol/L）和100μL过氧化氢溶液（体积分数浓度为1%）的基础上，考察8-羟基喹啉的用量、反应体系最终pH和反应介质3个方面的因素，最终确定了该化学发光体系优化浓度比例。
1）8-羟基喹啉的用量对体系发光值稳定性的影响
随着向体系中加入8-羟基喹啉工作溶液的增多，体系的发光值持续降低，直到当加入50μL8-羟基喹啉工作溶液，体系的发光值不再随着8-羟基喹啉加入量的增加而降低。在仪器计量工作中，可以选择加入50~85μL8-羟基喹啉工作溶液，此时8-羟基喹啉的体积对发光强度的影响最小。在后续实验中，选择65μL作为优化的8-羟基喹啉加入量。
2）反应体系最终pH对体系发光值稳定性的影响
鲁米诺的化学发光反应需要OH-的参与，因此体系的pH也是影响发光值的重要因素之一。当pH＞10.0，体系的发光值会随着pH增大而呈指数增加，体系不容易控制；当pH值在8.80~9.60范围内，体系的发光值增长比较稳定，可以满足仪器计量检定中操作方便的需求。
3）缓冲体系对体系发光值稳定性的影响
考察了相同浓度的Tris-HCl、H3BO3-KOH、Na2CO3-NaHCO3和B-R缓冲溶液对鲁米诺-过氧化氢-铁（III）-8-羟基喹啉化学发光体系的影响，发现Tris-HCl中化学发光信号最为稳定，故选择Tris-HCl缓冲溶液；最终体系定为：加入50μL0.05mol/L的Tris-HCl缓冲溶液，pH=9.10。通过对8-羟基喹啉的用量、反应体系最终pH和反应介质3个方面的考查，确定了化学发光分析仪计量用鲁米诺-过氧化氢-铁（III）-8-羟基喹啉体系，其用量分别为：10μL摩尔浓度为1×10-3mol/L鲁米诺工作溶液（pH13.0）、100μL体积分数为1%过氧化氢溶液、65μL摩尔浓度为1×10-3mol/L8-羟基喹啉工作溶液（pH2.0）、和50μL0.05mol/L的Tris-HCl缓冲溶液（pH=9.10）。此时化学发光强度与Fe（III）的摩尔浓度具有很好的线性关系。
2.2生物发光标准体系的建立
在众多生物发光体系中，ATP-荧光素-荧光素酶发光体系应用最为广泛，ATP检测也经常被业内用于化学发光分析仪灵敏度的衡量指标。其原理是：荧光素酶在有氧条件下，可以和荧光素结合后催化ATP转化成AMP（磷酸腺苷），同时释放出光子（波长562nm），发光效率高，而且发光强度与ATP含量呈很好的线性关系。为了统一仪器灵敏度的评价方法，我们研制了ATP标准物质，并结合商品化ATP检测试剂盒，建立了一套稳定可靠的ATP生物发光标准体系，用于化学发光分析仪的计量校准。
2.3生物化学发光标准体系
在仪器计量校准中的应用最终将化学发光标准体系和生物发光标准体系联合，共同对化学发光分析仪进行计量校准研究，对仪器的计量性能进行全面的考察：采用鲁米诺-过氧化氢-铁（III）-8-羟基喹啉化学发光标准体系对伯托LB962型化学发光分析仪的测量重复性、交叉污染和线性相关系数的计量特性进行评价；采用ATP生物发光标准体系作为标准光源对伯托LB962型化学发光分析仪的灵敏度的计量特性进行评价。
2.3.1测量重复性
以1×10-5mol/LFe（III）标准工作溶液进行测量，重复测量6次，相对发光强度值分别为302579，298800，321145，299523，338856，356041，计算其相对标准偏差为7.4%，即为仪器的测量重复性。实验数据说明仪器测量重复性较好；同时也说明建立的化学发光标准反应体系发光值稳定，完全可以用于仪器测量重复性的计量特性的评价。
2.3.2交叉污染测量中心孔
（样品位置，1×10-5mol/LFe（III）标准工作溶液）发光值I0和周围孔发光值I0i，如表1所示，周围孔发光值的平均值与中心孔发光值之比的百分数即为化学发光分析仪的交叉污染。由实验数据可以看出，中心孔的发光对周围孔发光影响很小，仪器的交叉污染仅为0.02%，与仪器的出厂指标无明显差异；同时证明了我们建立的化学发光标准反应体系可以用来评价仪器的交叉污染的计量特性。
2.3.3线性相关系
数采用化学发光标准体系对0，1×10-6，3×10-6，1×10-5，3×10-5，1×10-4mol/LFe（III）标准工作溶液进行测量，考察仪器测量线性相关系数，以检测发光值信号减去本底信号得到的相对发光值ΔI为纵坐标（本底信号为Fe（III）摩尔浓度为0时的发光值），Fe（III）的摩尔浓度为横坐标绘制标准曲线，Fe（III）在1×10-6~1×10-4mol/L范围内呈良好的线性关系：ΔI=2×1010C-22396，线性相关系数r=0.9986。使用ATP生物发光检测试剂盒对0，1×10-11，1×10-10，1×10-9，1×10-8，1×10-7mol/LATP标准工作溶液进行分析，考察仪器测量线性相关系数，以相对发光值Δ（IΔI为检测发光值信号减去本底信号，本底信号为ATP浓度为0时的发光值）为纵坐标，ATP的摩尔浓度为横坐标绘制标准曲线。ATP在1×10-11~1×10-7mol/L范围内呈良好的线性关系：ΔI=7×1012C+550，线性相关系数r=0.9999。采用化学发光标准反应体系和生物发光标准反应反应体系评价仪器的线性相关系数分别为0.9986和0.9999，说明仪器的线性相关系数的性能指标较好；这两种反应体系均能评价仪器的线性相关系数的计量特性。
2.3.4灵敏度使用
ATP生物发光检测试剂盒对空白溶液的本底信号进行测量，平行检测11次，本底信号相对发光强度分别为29，34，32，34，40，47，37，42，34，39，32，计算检出限（3×S/N）为2.24×10-16molATP（100μL样品体积），即为化学发光分析仪的灵敏度，达到仪器的出厂指标，说明ATP生物发光标准反应体系可以用来评价仪器的灵敏度的计量特性，统一了化学发光分析仪灵敏度的表示方法。
3结束语
化学发光篇2
亚硝酸盐广泛存在于食品和环境中，在酸性条件下能与胺类化合物形成致癌的N亚硝胺类化合物。因此，亚硝酸盐检测具有重要意义。目前亚硝酸盐的分析方法主要有紫外分析，荧光分析和电化学分析等。紫外分析法涉及复杂的重氮化反应，荧光分析需要特异荧光探针，均具有一定局限性。
清华大学林金明课题组自2002年以来，致力于化学发光检测亚硝酸盐的分析方法研究。该方法的主要原理，可以阐述如下：亚硝酸盐和过氧化氢在酸性条件下反应生成过氧亚硝酸。过氧亚硝酸在碱性条件下，转化为过氧亚硝酸盐，过氧亚硝酸盐的分解可以产生单线态氧，当其跃迁回基态时，其能量以光辐射的形式释放，该光信号由光电倍增管检测。表面活性剂和荧光物质可极大增强该体系化学发光强度（Anal. Chim. Acta, 2002, 474: 107～114）。当二氧化碳存在时，过氧亚硝酸根可与其反应生成ONOOCO2－，该物质分解为 NO2• 和CO3•－。 CO3•－质子化后形成的HCO3•自由基，通过自聚合产生二氧化碳分子二聚体（CO2）2*，该激发态物质以光辐射形式释放能量并产生CO2。 据研究发现，棉花等固相材料对该体系有较大的增敏作用（Anal. Chim. Acta, 2004, 510: 29～34）。
为了进一步提高亚硝酸根离子检测的灵敏度和稳定性，林金明课题组通过微波加热的方法，合成一种荧光产率高、稳定好且水溶性的碳点。通过研究发现该碳纳米材料与NaNO2H2O2体系作用时，可观察到非常强的化学发光现象，并且光强与1.0×10－7至1.0×10－5 M浓度范围的亚硝酸钠有呈良好的线性关系。该课题组对碳点增强NaNO2H2O2体系的化学发光机理进行深入研究，并根据该发光现象建立了一种高灵敏，操作简便且干扰小的化学发光流动注射分析方法，用于测定牛奶和水样中亚硝酸钠（Anal. Chem., DOI: 10.1021/ac202039h）。
通过化学发光光谱可知该体系的最大发光波长为520 nm, 该位置与荧光碳点的荧光发射峰接近，由此确定该体系的发光体为荧光碳点。电子自旋共振技术可观察2，2，6，6四甲基4哌啶（TEMP）与单线态氧作用而形成的特征信号。利用该技术观察碳点加入NaNO2H2O2化学发光体系后单线态氧量的变化。研究发现，碳点的加入并没有增强单线态氧的信号，由此可知，化学发光信号的增强并非由单线态氧引起的。通过电子自旋共振技术对反应后的碳点进行观察，发现其g值发生明显的偏移。该结果表明，碳点在化学发光反应之后，其结构发生明显变化。抗坏血酸，硫脲等对碳点 NaNO2H2O2发光体系的发光强度有明显抑制作用，这表明自由基，尤其是羟基自由基，对体系的发光具有重大贡献。上述研究不仅对NaNO2H2O2体系的化学发光机理有了更为明朗化的认识，而且也对碳点发光的光学机理有了深入的了解。碳点增强NaNO2H2O2的化学发光的机理，可以归结为NaNO2H2O2体系中的自由基对碳点的作用。超氧阴离子自由基可作为电子供体，往碳点注入电子，使其形成CDs－； 过氧亚硝酸和羟基自由基等作为电子受体，往碳点内注入空穴使其形成CDs＋。CDs－与CDs＋的电子空穴复合过程，产生激发态的CDs*。当CDs*返回基态时，便以光辐射的形式释放能量。
化学发光篇3
【关键词】胰岛素（IRI）；光量子数；前胰岛素原；胰岛素原；化学发光免***法
【Abstract】ObjectiveToexploreareliablemethodforthedeterminationofinsulin.MethodsGatherfastingagglutinatingblood,centrifugalizethemrespectivelytogettheserum,whichweredirectlysetoninstrumenttodetermine.ResultsLinearrang:0～335.0mIU/L，senitivity:themeanquantumof0mIU/LIRI,10.1mIU/LIRI,152.0mIU/LIRIand335.0mIU/LIRIwere3808,30350,357399and684567.Specificity:whenthecontrolserumwasdetermined,themeasurevlaluewaswithinthestandarddeviation（SD）,95%-105%.Precision:N=60CV≤5%.ConclusionChemiluminescenceisareliable,stablemeasurementmethodfordeterminationofinsulinwithhighsensitivity,precisionandspecificity.
【Keywords】insulin;quantum;preproinsulin;proinsulin;chemiluminescence
胰岛素（IRI）是一种蛋白质激素，这是由胰岛中的β细胞所合成、储存和分泌的。IRI的功能是调节血液中葡萄糖的浓度水平。IRI初期是在β细胞中，以一种大分子量（分子量为1200）前胰岛素原的形式存在。前胰岛素原是一条由110氨基酸组成的单链前体。前胰岛素原被切除掉24个氨基酸序列后形成胰岛素原（分子量为9000），胰岛素原是胰岛素和C-肽的前体［1］。IRI是由两条氨基酸链组成的。最初，IRIA链是由21个氨基酸组成，B链是由30个氨基酸组成；而C-肽是由31个氨基酸组成。IRI是随餐后血液中葡萄糖的浓度高低而产生应答的。
IRI水平虽然不是糖尿病患者常规诊断方法，但是IRI水平的检测对于空腹低血糖患者、普通人群中的胰岛素耐受患者、β细胞分泌功能异常患者的意义非常大［2，3］。
1材料与方法
1.1原理IRI的测定是一种直接化学发光技术和双抗体两点夹心免***分析法相结合的测定方法。第一种抗体称为标识抗体，是由单克隆抗胰岛素抗体标记吖啶酯形成的；第二种抗体称为固相化抗体，是由单克隆抗胰岛素抗体以共价键的方式与顺磁性颗粒相结合形成的。血清中的胰岛素与相应抗体发生免***反应后产生光量子，其光量子数的多少与血清中胰岛素的浓度成正比，经标准曲线计算即可求得血清IRI的浓度水平。
1.2仪器与试剂仪器：BAERACS-180型全自动化学发光免***分析仪。试剂（双试剂）及标准液由广州宝迪有限公司提供。
1.3方法取血清于样品杯中，置全自动化学发光免***分析仪上，调整好检测参数：血清25μl+第一试剂50μl于37℃孵育5min，加第二试剂250μl于37℃孵育2.5min，用蒸馏水对反应杯进行分离、抽吸、清洗，最后分别加300μl酸试剂和碱试剂到反应系统中进行反应发光，读取光量子数，再根据标准曲线，计算出结果。
1.4标准曲线制备采用两点定标法，将标准血清0.0mIU/L和138.0mIU/L安放于仪器的定标位置上，编入测定程序，上机测定自动打印出标准曲线。
2结果
2.1精密度取混合血清分成两份，一份当天测定60次，结果IRI的值为22±0.8mIU/L，其对应的CV值为1.8%；另一份做批间试验，测定10次，测定统计值为21±1.2mIU/L，其对应的CV值为2.8%。
2.2灵敏度0mIU/L的IRI，其平均光量子数为3808，10.1mIU/L的IRI，其平均光量子数为30350，152.0mIU/L的IRI，其平均光量子数为357399，335.0mIU/L的IRI，其平均光量子数为684567。IRI测定的范围为0～335.0mIU/L。
2.3回收试验在IRI为25mIU/L的血清中分别加入浓度为1mg/L的胰岛素原、浓度为500μg/L的C-肽、浓度为1mg/L的胃泌素、浓度为1mg/L的胰高血糖素、浓度为1mg/L的胰泌素进行回收试验,分别测得其回收率为:100.8%，95.1%，96.6%，100.2%，101.6%。
2.4线性分析对一份定值血清稀释不同浓度，观察测定体系光量子数的变化量，即为IRI与光量子数的关系。结果显示：IRI在本法的测定范围是0～335.0mIU/L。当IRI大于335.0mIU/L时，开始偏离线性。因此对浓度高的标本必须先进行适当的稀释，然后测定。
2.5干扰试验当溶血（Hb>5g/L）、黄疸（胆红素>0.2g/L）时,对结果干扰甚微。
2.6正常参考值取100份经我院体检合格者的血清，其中男50份，女50份，年龄19～55岁，平均37岁。检测结果IRI：20.5±17.5mIU/L。男女之间差异无显著性（P>0.05）。
3讨论
目前定量测定IRI的方法不多，过去一般用放射免***法，该法测定步骤繁琐，为半自动化操作，测定时间长达3天，测定范围窄，且使用试剂具有放射性，对操作人员造成身体伤害及对周围环境形成污染。现在基本已被化学发光免***法所代替，该法测定步骤简单，为全自动化操作，测定时间短，全过程最短为半小时即可完成，而它使用的试剂安全无放射性，为一般化学试剂，对操作人员无伤害，对周围环境污染甚微。不过它也有缺点：其试剂为抗体试剂，有效期短，容易失效，定标周期短，一般为2周。在试剂的有效期内和定标周期内，对血清标本进行测定，其结果非常准确可靠。综上所述，化学发光免***法测定胰岛素（IRI）是目前首选的方法。
【参考文献】
1康格非,巫向前.临床生物化学和生物化学检验，第2版.北京:人民卫生出版社,2001，256.
化学发光篇4
【关键词】 化学发光微粒子免***法； 电化学发光法； 性能
Performance of Thyroid Stimulating Hormone by Chemiluminescence Particles Immune Method and Electrochemical Luminescence/FAN Chan，CHEN Shu，GONG Guo-zhong.//Medical Innovation of China，2016，13（18）：061-064
【Abstract】 Objective：To compare the performance of serum thyroid stimulating hormone by chemiluminescence particles immune method （CMIA） and electrochemical luminescence （ECLINA）.Method：Eight clinical samples was selected every day，including outpatient and inpatient，exclusion of hemolysis，blood lipid and medication situation，continuous determination of 7 d and the test results was recorded.The outliers was removed，the ECLINA was used as the contrast method for X axis and the CMIA was used as the experimental method for Y axis，the linear equation and correlation coefficient of CMIA and ECLINA were calculated for evaluation bias.Result：CMIA and ECLINA to determine the linear regression equation for thyroid stimulating hormone was Y=0.7863X+0.0632，correlation coefficient was r2=0.9946，There was a high correlation with the measured values of two methods.The two kinds of detection method of measured value were highly correlated （P
【Key words】 Chemiluminescence particles immune method； Electrochemical luminescence； Performance
First-author’s address：Central Hospital of Suining City，Suining 629000，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.18.018
促甲状腺激素（Thyroid stimulating hormone，TSH）是由腺垂体嗜碱性细胞分泌的一种糖蛋白类激素，是判断下丘脑-垂体-甲状腺轴功能的首选指标，是诊断甲状腺疾病重要的第一线指标[1-2]。随着检验医学的发展，化学发光法测定血清TSH已成为甲状腺功能检查的常规手段。然而不同的化学发光分析系统检测结果是否一致，是实验室需要探讨的重点。因为在甲状腺疾病诊断中，促甲状腺激素的水平至关重要，特别对于亚临床患者，主要看促甲状腺激素水平。因此，本文对血清TSH电化学发光免***分析与化学发光微粒子免***分析测定结果进行分析，系统地对两种不同方法进行对比分析及偏移评估，从而探讨不同检测系统间对同种测定项目的检测结果是否具有可比性，并为判断临床的可接受性提供依据，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 电化学发光法所用仪器为罗氏CobasE602全自动电化学发光分析仪，所用试剂为德国罗氏试剂（批号：182942-01，规格：200测试/盒），质控品为德国罗氏免***通用质控品（批号：177813-04），定标液为德国罗氏TSH定标液（批号：180413-01）；化学发光微粒子免***法所用仪器为雅培I2000SR化学发光免***分析仪，试剂为美国雅培试剂（批号：44904U100，规格：4×500测试/盒）；TSH校准品为雅培试剂（批号：45240u100），质控为美国伯乐免***分析用质控液（批号：40271 40273）
1.2 样本 采集遂宁市中心医院本部门诊及住院患者当日血清8份，连续采集7 d，共56份。
1.3 方法
1.3.1 实验前检测 两个检测系统参加卫生部室间质评成绩均合格且每次实验前各分析系统均进行高低值质控测定且均在控。保证了所有对比实验数据的准确可靠。以电化学发光法为对比方法（X），化学发光微粒子法为实验方法（Y）。通过相关分析、偏差分析及可接受性评价，比较两种方法的相关性能。
1.3.2 样本测定 每日选取适合的患者样本，包括正常值和异常值，排除高血脂、溶血等情况，保证检测系统不受干扰。在选取的对象中，有部分是结果异常也就是甲状腺功能异常患者，他们的***前和***后的检测各算一次单独的个体。因为在***前无药物对检测的影响，而***后药物是否影响检测和对哪种检测系统有影响暂不清楚。因此，测定时分别用两种检测系统按顺序标号进行随机测定，再按反向编号重复测定，且在2 h内两种检测系统对同批标本分别实验，这样重复记录7 d，供56份样本，计算每个样本的测定结果的均值。
1.4 观察指标 离群点的检查：记录检测结果，计算每个样本测定结果的均值（Xi）和Yi）、样本重复测定值间差值的绝对值（DXi和DYi）及两种方法测定结果均值间的差值（Xi-Yi）。计算样本重复测定值间差值（DXi和DYi）的平均数。计算两种方法测定结果的均值间差值（Xi-Yi）的平均数。判断：超出上述平均数4倍时，检验结果视为无效，查明原因剔除数据并作偏差分析。
1.5 统计学处理 使用Office Excel 2003软件对所有数据进行分析，数据以（x±s）表示，作t’检验。
2 结果
2.1 以Yi对Xi作散点*** 每份标本在每个检测系统中连续测定两次，记录结果计算其平均值，以化学发光微粒子法为实验方法所测得的平均值Yi作为Y轴，而电化学发光法为对比方法所测得的平均值Xi作为X轴，两组数据做散点***，计算相关系数：r=0.7863，截距为0.0632。可见实验方法与对比方法之间有很好的线性模式，排除离群点后，计算两种方法测定患者血清样本促甲状腺激素浓度结果的线性回归方程为Y=0.7863X+0.0632，相关系数r2=0.9946，将方法比较的原始数据（X和Y值）求得的相关系数r及例数（n）带入t检验的统计学公式，求得tr>t0.01（v），P
2.2 以（Yi-Xi）对Xi作偏差*** 以两检测系统测定所得的结果作差取其绝对值（|Yi-Xi|）作为Y轴，对比方法两次测定结果的平均值Xi作为X轴，以上述同样方法作***，发现实验方法偏差较小，但随着结果的增高偏差增高。可见较低水平时，实验方法偏差较小，随着结果的增高实验方法出现的偏差也随之增大，见***2。
2.3 TSH的临床可接受性评价 计算在给定医学决定水平的相对偏差，根据不同医学决定水平与相对偏差判断各项目的预期偏差是否可以接受：由表1中可以看出两种方法间对于不同水平的测定出现的相对偏差较小，均在1/2CLIA’88允许的范围内，因此同一实验室里两台检测系统均可作为单独的检测系统，并且对于结果的解释相同，临床评价为可接受，见表1。
3 讨论
促甲状腺激素（TSH）是一种糖蛋白由垂体前叶合成、释放激素，是机体甲状腺素发挥作用的中枢调节机构，同时也有刺激甲状腺素细胞增殖以及激素的生成和分泌效应[3-5]。促甲状腺激素由两种亚单位α、β组成，其中α亚单位与促黄体生成素（LH）、***刺激素（FSH）和人绒毛膜促性腺激素（hCG）的α链上的某些氨基酸组成的肽段有一致性检测时易受此类激素的影响；而β亚单位携带TSH特异的免***学和生物学信息。TSH检测是甲状腺功能的初筛实验。游离甲状腺浓度微小变化就会带来与生理功能相反方向的显著调整。特别在临床上，无典型临床症状时，如亚临床甲亢、亚临床甲减、诊断甲状腺功能异常主要依靠TSH水平。因此TSH是判断甲状腺功能非常敏感的特异性参数，特别适合于甲状腺功能混乱的早期诊断及排除下丘脑-垂体-甲状腺中枢调节环路的功能紊乱的检查[6-9]。因此对于TSH的检测系统要求比较高，实验室准确检测TSH的水平将为临床诊断和***甲状腺疾病提供可靠的实验数据。但检测TSH的方法多种多样，有免***法、电化学发光法、放射免***法等，目前被公认较为灵敏可靠的是电化学发光免***测定法，具有较高的灵敏度和特异性[10]。然而，当实验室具备两套或多套监测的系统时。往往不可能用两套系统同时检测，此时，患者的结果或复查时怎样才能真实反映患者的水平呢？因此，本文以电化学发光技术作为参考方法，比较化学发光微粒子免***法和电化学发光法的检测性能，以方便实验室具备两套检测系统时做结果均一性利用于临床。
目前，化学发光微粒子免***法（CMIA）检测TSH项目采用两步法免***检测，运用Chemiflex技术，即化学发光微粒子免***检测（CMIA）技术与灵活的检测模式的结合，测定人血清中是否含有TSH[11]。本研究采用全自动微粒子化学发光免***分析系统是以链霉和素为固相载体，用lumi-hos503为发光底物，在碱性磷酸酶（apase）作用下磷酸酯基发生水解，脱去一个磷酸基面而得到一个中等稳定的中间体AMPD，在中间体分子内电子转移裂解为一个分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间期苯甲酸甲酯阴离子，当回到基态时产生470 nm
的光子，并可持续数十分钟的发光反应[12]。而电化学发光法（ECLINA）采用了钌标记抗原或抗体，再引入链霉亲和素、生物素放大系统，产生的抗原抗体复合物，经电场作用，发光剂三联吡啶钌[Ru（bpy）3]2+标记Ab，通过Ag-Ab反应和磁珠分离技术，根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度对待测的Ag或Ab进行定量测定，此方法具有快速、准确的优势。从本文的实验结果来看，实验方法与对比方法均有较好的检测性能，以电化学发光法为参照方法，化学发光微粒子法为实验方法时，结果表现为实验方法与对比方法有很好的相关性，r=0.7863，符合实验室结果均一性要求，可根据参照方法判断实验方法的性能，降低同一系统不同时间检测数值不同现象的发生，符合临床对TSH异常的甲状腺疾病诊疗的的要求；另一方面，评价两仪器的稳定性，从偏差分析来看，在低水平时实验法偏差较小，这与低水平状态下，由于标本本身水平的低值，仪器没法反映出来有关，随着结果增高实验方法偏差也跟着增大。但对于电化学发光法也即参照方法来说不管测定水平如何，其偏差较化学发光微粒子免***法的小。因此可以理解为，电化学发光技术稍优于化学发光微粒子免***法，分析其原因，可能与电化学发光免***法试剂性能较稳定有关，但两种方法测定效果均能满足临床要求[13-14]。从表1结果来看，在评价TSH临床可接受性时，计算给定医学决定水平的相对偏差时，根据不同医学决定水平与相对偏差判断项目的预期偏差是否可以接受，发现电化学发光法和化学发光微粒子法同时检测TSH时，两种检测系统相对偏差在低水平时较小，但是，当水平升高时，也是随着结果的增高，相对偏差也跟着增大，这可能与检测系统或试剂性能有关，此观点与雷荔荔等[14]的电化学方法报道较一致，虽然两种检测方法检测TSH水平时，化学发光微粒子法表现出随着水平增高，其结果偏差变大，但均在1/2CLIA’88允许的范围内，故其检测结果均能被临床所接受。因此，从实验比较来看，两种方法无明显的差异。在同一实验室具备两种检测系统时，不用担心患者复查时不是同一检测系统所导致结果不一致而误导临床的现象。另外，鉴于TSH作为甲状腺功能的敏感指标，临床诊疗对检测要求高。在选取的检测标本中，有意的选取了部分患者***前***后的标本来检测，通过实验发现，两种检测系统并没有因为患者用了药之后出现结果明显的偏差，这与赵静峰等[15]的报道基本一致。
因此，CMIA法和ECLINA法准确度精密度灵敏度均符合临床要求，且自动化程度高，减少了人为操作误差，两种方法呈高度相关，结果没有太大偏差，可以建立相关方程，在某一方法不能满足实验室，而参考值又不能变换时可以用另一方法代替。特别对于复查患者，第一次和第二次检测时，虽然检测系统不相同，但亦不会因为检测系统的性能差和使用药物后影响实验数据而对患者自身的病情反映出现差异。
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化学发光篇5
有机及配合物电致发光（EL）和非线性光学材料在高新技术中的广泛应用，受到人们的关注并得到积极的研究[1-3]。近30年来，随着量子化学计算方法和分子模拟技术、以及计算机技术的飞速发展，对材料科学的发展产生了深刻影响。利用量子化学计算方法方法研究EL材料的电子结构和光谱性质，以全自由度优化几何结构为基础，计算化合物的电子光谱。对研究此类材料的性质及合成有指导性意义计算结果是实验结果基本吻合。本文主要介绍量子化学在EL材料研究中的应用及进展。
1 量子化学研究EL材料的方法及原理
就量子化学的几种计算方法来看，从头算法虽然有严谨的理论支持，能得到较好的计算结果，但是当遇到诸如酶、聚合物、蛋白质等大分子体系时，计算很耗时，其计算代价无法承受[4]。为了在计算时间和计算精度上找到一个平衡点。采用量子化学半经验方法AMI进行了理论计算包括构型优化、振动分析电子光谱计算。科学家们以从头算法为基础，忽略一些计算量极大，但是对结果影响极小的积分，或者引用一些来自实验的参数，从而近似求解薛定谔方程，就诞生了半经验算法。如：AM1，PM3，MNDO，CNDO，ZDO 等[5，6]。目前，对多类EL材料的研究大部分都是基于量子化学的半经验方法。
2 光谱性能的量子化学半经验计算
EL材料的发光颜色与材料的荧光光谱有密切的关系，荧光即是电子由第一激发单重态跃迁回基态所产生的降级辐射。目前对光谱性能的量子化学计算多半基于量子化学半经验方法PM3和AM1，先对化合物的几何构型进行了全参数优化， 得到其稳定构型，再进行振动分析，在此基础上利用单激发态组态相互作用方法（CIS）计算它们的电子光谱。
比如苏宇，廖显威[7]等人采用量子化学半经验方法PM3对三种黄酮类化合物的荧光光谱进行了理论研究。对各化合物优化后的构型作了振动分析，均未出现虚频率。在此基础上，采用单激发组态相互作用方法（CIS） 计算荧光光谱，所有计算结果与实验值基本吻合。廖显威，李来才[8]采用单激发组态相互作用（CIS）方法，分别计算了4 种稠环芳烃的电子光谱，选了801个组态进行计算，所得结果与实验值基本吻合。他们还对几种含氮芳烃化合物有机EL材料，对FL-4、 FL-7、FL-10 和FL-12的光谱进行研究，计算结果与实验值基本相符合。薛照明，张宣***[9]等用PM3/SCI方法计算了三个分子的电子吸收光谱，测定了三个分子的电子吸收光谱和荧光光谱（DMF溶液）。结果表明理论计算值与实验值相当吻合。高洪泽，石绍庆等利用量子化学半经验AM1及INDO/SCI方法研究了B与8-羟基喹啉的螯合（LiBq4）的电子结构和光谱性质，计算得到基态到各激发态的垂直跃迁能和振子强度，获得电子光谱。分析出由于配体中苯酚环、吡啶环对不同前线轨道的贡献不一样，所以在吡啶环和苯酚环上引入取代基会对光谱发生影响，为分子设计提供理论指导。
3 量子化学对EL材料结构的分析
结构与性能的关系一直是量子化学的主要研究领域，它涉及的范围非常广泛，从无机小分子、有机分子到高聚物和生物大分子，从人为设计的理想模型分子到实用的药物分子和材料分子等[10]。通过结构与性能的研究，人们可以逐类地对一些化学现象进行统一的解释，得出一般性的规律，进而预言一新的化学事实，指导设计新的实验。目前国际上关心的课题主要有：重要新型无机分子、有机分子和原子簇化合物的化学键本质的研究；重金属、稀土元素化合物的成键规律；（半）导体材料、磁性材料、光电材料等。
高洪泽，石绍庆[11]等通过量子化学半经验方法研究了蓝色有机薄膜电致发光材料LiBq4 电子结构，国外研究人员在这方面已做了不少努力，合成了很多类型的蓝色发光材料并且制备了相关器件[12-15]，但多数都没有获得突出的结果。由于LiBq4体系相对分子质量较大，迄今未见有对其进行理论研究的报道.他们通过计算结果表明，各个喹啉环基本保持各自的面共轭结构。计算得到的稳定几何结构和的主要键长。为探讨其发光机理及B和Li 元素在其中所起的作用及M ―N键的共价性、离子性对发光的影响，为进一步探索合成与设计具有优良性能的蓝色发光材料提供理论依据和指导。
4 振动分析
判断分子是否处于稳定构型的一个重要方法是看它的振动光谱是否出现虚频率[16]。刘芳玲，张红梅[17]等对萘及其卤代化合物在B3LYP /6-31G水平下优化了4种化合物的几何构型， 在振动分析中，其振动光谱均未出现虚频率， 说明构型优化基本合理性。
化学发光篇6
【摘要】流动注射化学发光法在近些年来得到了迅速发展，因为其分析的速度快，成本低廉，并且线性广泛，需要的仪器设备简单。它对于测定生物和药物中的金属、非金属、无机盐以及蛋白质内的各种化学物质有些高敏感度。本文把流动注射化学发光法能够检测的六个部分中的药物检测作为重点进行论述。
【关键词】流动注射；化学发光；药物分析
1流动注射化学发光法的概念
流动注射即flow injection是丹麦的著名学家Ruzicka和Hansen提出的，它的出现摆脱了溶液化学分析平衡理论，，是非平衡条件下的化学分析为可能。因为流动注射的范围广，检测分析中包括高灵敏度、高选择性但不稳定的反应、动力学反应以及化学发光和生物反应，因此它能够得到一个平衡的体系无法提供一个更为广泛的信息［1］。流动注射分析是一种容易实现现场与邻近实验室连线的自动分析系统［2］。它的优点在于所需要的仪器少，并且设备简单，灵敏度高，试剂量也很少，并且反应度和灵敏度高，能够检测的维度广，被各个领域应用，成为一个检测的主流技术。
2 流动注射化学发光法药物分析
药物是人们日常生活不可缺少的必备品，因此药物安全是现在社会是人们热点关注的问题，因为药物分析研究本身需要检测仪器的高敏感度，并且测定量一定要精确，而且检测仪器繁重并且所需要的药剂量高，而流动注射化学发光法却打破了大仪器、大药剂量的检测方式。它给药物的流动注射化学发光最有效的痕量分析技术。
3 流动注射化学发光法的应用
3.1流动注射化学发光法在农药分析检测应用
农药作为现在农业生产必备的生产资料，在防御病虫害，保护农作物生长以及生产量有着非常重要的作用。但是农药因为药物中的成分以及大量使用给人类身体健康以及动物身体健康都有着胃寒和影响，即便对植物本身也有着影响。因此，需要流动注射化学发光法进行农药成分的测定以及农作物的农药残留检测，该方法主要应用于农药分析中一下物质，如表1：
表1application of flow injection chemiluminescence in pesticide analysis
测定药物 测定样本 试剂 反应介质 线性范围 检出限
氨基乙酸 药剂 荧光素-NBS C(NaOH)=0.17mol・L-1 0.1～100.0 3.0×10-2
异丙威 杀虫剂 连二亚硫酸钠 C(H2SO4)mol・L-1 0.1～10.0 8.0×10-2
抗蚜威 水样 罗丹明B-Cu2+-H2O2 C（多聚磷酸)mol・L-1 0.1～10.0 5.8×10-2
敌敌畏 蔬菜样品 鲁米诺- H2O2-OP C(NaOH)=0.04 mol・L-1 0.08～25.0 2.2×10-2
代森锌 杀菌剂 荧光素-NBS C(NaOH)=0.02 mol・L-1 0.9～700.0 3.0×10-1
敌百虫 杀菌剂 鲁米诺- H2O2 pH(NaOH-NaOCO3)=1.8 0.01～10.0 3.2×10-3
乐果 合成样品 鲁米诺- H2O2 pH(NaOH)=12.0～12.5 0.01～10.0 8.0×1032
敌草快 除草剂 铁氰化钾-奎宁 C(NaOH)= 0.1mol・L-1 0.01～0.6 2.0×10-3
注：NBS：溴代琥珀酰亚胺；OP；聚乙二醇辛基苯醚
3.2流动注射化学发光法在医用药品分析中的应用
在现代社会中，人们更加关注自身的身体健康，医药分析显得极为重要，流动注射化学发光法对于药效作用机制以及动力学和吉利等方面的作用，并且对于一些计量敏感，副作用多的药物成分进行分析是一般科学实验室的器材的灵敏度无法比拟的，而流动注射化学发光法却能够用简单的仪器和小的检测药剂量，分析出医药分析，如***2所示：
表2application of flow injection chemiluminescence in pesticide analysis
测定药物 测定样本 试剂 反应介质 线性范围 检出限
仑氨西林 合成样品 鲁米诺- H2O2 C(NaOH)=0.05mol・L-1 0.1～10.0 5.6×10-2
白藜芦醇 药剂 NCS-鲁米诺 C(NaOH)=0.1mol・L-1 0.0025～0.08 8.0×10-2
邻二苯酚 血清 KIO4-鲁米诺 C(NaOH)=0.1mol・L-1 0.1～10.0 1.5×10-4
舒必利 片剂 铈（Ⅳ）-亚硫酸钠 C(C2H402)=0.1mol・L-1 0.0084～0.12 3.1×10-3
异烟肼 药剂 荧光素-NBS C(NaOH)=0.01 mol・L-1 0.1～10.0 6.0×10-3
去乙酰毛花苷 注射剂 KIO4-鲁米诺 0.01～10.0 3.2×10-3
强力酶素 尿样 罗丹6G-Ce（Ⅳ） C(H2SO4)= 0.02mol・L-1 7.9×10-7～1.9×10-5 8.2×1032
诺氟沙星 胶囊 KIO4-鲁米诺 C(NaOH)=2.0 mol・L-1 0.006～1.0 9.0×10-4
注：NCS：N-氯代丁儿酰亚胺；*标注数字单位为：mol・L-1
4展望
流动注射化学发光法的应用领域在药物分析领域不断的延伸发展，因为它具有高灵敏性，检测体系高尖端，能够开发新的搞笑发光试剂以及发光体系。此外流动注射化学发光分析技术和其他的技术的联合使用更够满足更多化学、免***、矿物质、临床医药等领域。由此可以看出流动注射化学发光法对于药物分析领域的发展十分广阔。
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化学发光篇7
关键词：溶血；化学发光法；CEA；AFP
临床上有多种检测AFP和CEA的方法，如酶联免***吸附法、放射免***法等等[1]。而化学发光免***分析法是最近几年新发展起来的一项标记免***技术，其自动化程度与灵敏度具高且安全无污染，是一种很好的免***测定技术，可以用来测定多个项目，如肿瘤标志物、药物浓度等等。我们通过实验来探讨溶血对化学发光法检测CEA和AFP结果的影响，现将结果报道如下：
1.资料与方法
1.1取样：随机抽取当日静脉血标本30份，待血液标本凝固后，以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清即作为非溶血的标本，记作A1、B1组；然后把剩下的标本进行搅拌使其溶血，再以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清即得到中度溶血标本，记作A2、B2组；最后将剩下的放入冰箱冷冻室，次日取出自然溶解后以3000r/min的速度进行约10分钟的离心处理，取离心后每份标本300ul血清，即得到重度溶血标本，记作A3、B3组。
1.2方法：利用化学发光免***分析仪分别测定非溶血标本、中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值，每份标本测3次，记录下每次测得的结果数值，最后取平均值得到结果。
1.3观察指标：通过测得的中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值与非溶血标本测得的CEA与AFP值做比较，来得出结论。
1.4统计学方法：采用spss16.0进行数据的统与处理计，将中度溶血标本、重度溶血标本的CEA与AFP值与非溶血标本测得的CEA与AFP值做t检验，P>0.05表示无统计学联系，P
2.结果：
采用t检验对于结果进行统计分析。对于CEA的测定，中度溶血组（A2 ）相对于非溶血组（A1 ），P
3.讨论：
甲胎蛋白（AFP）是在胎儿发育的早期阶段，有卵黄囊和肝脏合成的一种血清糖蛋白，分子量为70Kd，电泳时位于α1球蛋白和白蛋白之间，但在出生后不久便慢慢消失，血清AFP浓度的检测是诊断原发性肝癌和胚胎细胞肿瘤的重要指标；癌胚抗原（CEA）是一种结构复杂的可溶性糖蛋白，分子量约为180Kd，胚胎期的时候主要存在于胎儿的肝脏、胰腺以及胃肠管中，出生后大幅度降低，胃肠道恶性肿瘤时常见血清CEA的异常升高，而在肺癌、***癌等其他恶性肿瘤患者的血清中，CEA也常常升高，故而CEA是一种广谱肿瘤标志物[2]。
血液标本中的CEA和AFP可以用多种方法予以测定，常规的有酶联免***吸附法、放射免***法等等，而近年来发展迅速的化学发光免***分析法具有灵敏度高、自动化程度高、安全无污染等优点[3]。而化学发光免***分析法的原理是采用双抗体夹心法，首先加入抗体致敏微粒，然后再在其中加入适量的待测样本，最后需要将标记抗体加入其中即可。由于化学发光氧化剂具有氧化作用，我们便可以通过这种氧化作用，测得的光量子数就和待测样本中的抗原浓度成正比，从而测出结果[4]。化学发光反应的原理实际上与酶联免***以及放射免***中的双抗体夹心法和竞争法有着非常类似的地方[5-6]。但是化学发光反应是测得的光量子数就和待测样本中的抗原浓度成正比，即线性关系，其本身并不受到颜色反应的一些影响与干扰。从理论上来说的话，黄疸、脂血以及溶血标本并无影响，但有研究显示，到了实际的操作检测中，标本的溶血程度不同对于化学免***检测的项目可以产生不同程度的影响[3-4]。研究显示，当标本溶血后，会对许多实验室检验的结果有着非常大的影响，从而导致得出错误的分析与结果，误导临床研究与诊治[7]。溶血标本对检验结果影响的原因大致有以下几种：①标本的颜色可能会受到标本溶血的干扰，比如说乙肝表面抗原的酶联免***吸附试验来检测血红蛋白的释放会造成本底的升高以致过氧化物酶释放出来从而产生假阳性，又比如说胆红素的重氮反应等等。②细胞内外待检测物浓度的差异，比如说钾、镁等电解质，又如***酸脱氢酶、醛缩酶、丙氨酸氨基转移酶等等。
从以上研究中我们不难发现，血液标本的溶血尤其是重度的溶血确实会对实际中临床检验产生较为巨大的影响，从而导致得出错误的分析与结果，误导临床研究与诊治。这样就要求我们在实际工作中要非常认真地做好标本的保存与处理，要及时地运送、检验标本，保持标本的新鲜，减少并尽量避免溶血的发生，从而能够达到有效的因为溶血而导致的检测结果的误差，提高临床诊断***的正确性[8]。此外我们也要根据检测项目的不同从而采取不同的标准来决定标本是否可用。这样既可以保证检测结果的准确性，提高临床诊断***的正确性，又可以避免重复抽血对患者造成的身体上的痛苦与经济上的损失。
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化学发光篇8
关键词：化学发光法；甲状腺激素；自身免***性甲状腺病；促甲状腺激素
自身免***性甲状腺病（Autoimmune Thyroid Disease，AITD）是由于自身免***紊乱导致甲状腺疾病，其在临床上的女性发病率高于男性【1】。现代研究表明自身免***性甲状腺疾病时是在遗传因素与环境因素的相互作用下导致抑制性T淋巴细胞功能减退或数量下降，可以分泌大量抗甲状腺自身抗体，触发甲状腺内自身免***反应【2】。而甲状腺激素在体内有着重要的生理生化功能，甲状腺激素的代谢与功能异常可导致甲状腺功能紊乱【3】。随着医学技术的发展，化学发光法检测甲状腺激素得到了广泛应用【4】。本文为此具体探讨了化学发光法检测自身免***性甲状腺病患者甲状腺激素的临床应用效果，现报告如下。
1 资料和方法
1.1研究对象
选择我院2012年5月-2014年12月收治的74例自身免***性甲状腺病患者作为观察组，并选取同期健康体检者74例作为对照组。两组入选者入院后经临床检查均已排除患有感染性疾病、其他内分泌疾病以及其他自身免***性疾病。观察组中毒性弥漫性甲状腺肿患者38例，桥本氏甲状腺炎患者36例；年龄24-55岁，平均年龄35.14±9.33岁，其中男性18例，女性56例。对照组中年龄20-58岁，平均年龄36.52±9.27岁，男性19例，女性55例。两组受试者在性别、年龄方面并无明显差异，具有可比性（P>0.05）。
1.2 样本采集
抽取两组受试者的空腹静脉血3 ml于促凝管，4℃低温离心（3000rpm/min离心5min）分离上层血清，-20℃冰箱保存。
1.3 检测方法
在甲状腺激素测定中，测定的指标包括游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺激素（TSH），都用化学发光法检测检测，所有测定项目均严格按说明书操作，并且由同一检验人员完成。参考值：FT3：3.80-7.00 pmol/L，FT4：7.90-18.40 pmol/L，TSH：0.34-5.60mIU/L。
1.4 统计方法
选择SPSS15.00软件进行数据分析，结果数据以平均值±标准差（x±s）表示，对比采用t检验，以P
2 结果
经过化学发光法检测，观察组的血清FT3与FT4值明显高于对照组，而血清TSH值明显低于对照组，对比差异经t检验都有统计学意义（P
表1：两组受试者甲状腺激素检测结果比较
3 讨论
自身免***性甲状腺疾病是临床上比较常见的免***性疾病，主要包括毒性弥漫性甲状腺肿和桥本氏甲状腺炎等。目前临床已确定约有80%-85%的甲状腺功能亢进症患者由毒性弥漫性甲状腺肿引发，而毒性弥漫性甲状腺肿的发病则与自身免***有着密切的关系【5】。相关研究已证实，自身免***性甲状腺疾病的病机在于Th2细胞在Th1/Th2细胞平衡中所占的比重，当Th2占有优势时，其所分泌的细胞因子可上调体液免***，进而激发甲状腺自身抗体的大量生成，促使甲状腺组织产生病理改变【6】。
甲状腺激素在体内有着重要的生理生化功能，由肝细胞合成的血清甲状腺激素结合球蛋白是血液中甲状腺激素的主要结合蛋白，甲状腺激素的代谢与功能异常可导致甲状腺功能紊乱。本研究经过化学发光法检测，观察组的血清FT3与FT4值明显高于对照组，而血清TSH值明显低于对照组，对比差异经t检验都有统计学意义（P
近来随着研究的深入发现甲状腺激素还参与炎性反应、免***、糖脂代谢等病理生理过程，其对免***作用的影响其主要表现在影响树突状细胞和Th1细胞水平，同时其还可同时作用于Th1和Th2，维持两者之间的平衡，对防治自身免***性甲状腺疾病的发病有着积极的作用【8-9】。
总之，化学发光法检测自身免***性甲状腺病患者甲状腺激素的临床应用能有效判定疾病状况，具有很好的临床检测价值。
参考文献：
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化学发光篇9
【关键词】化学发光 ；肝纤维四项；肝纤维化
【中***分类号】R44 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）03-0094-01
1 材料与方法
1.1 对象
选择2013年1月-2013年12月我院的肝病患者，其中男105例，女55例，年龄30-70岁，平均（61.5±17.5）岁，共150例，其中，85例患有慢性肝炎，25例轻度，45例中度，15例重度，45例肝硬化，20例原发性肝癌患者。选择150例健康患者作为对照组，其中87例，女63例，年龄30-70岁。
1.2 方法
1.2.1检测方法：在清晨抽取患者空腹静脉血8ml，标本当日无法检测，及时分离血清保存于-20℃保存，在5日内完成检测。试剂来自北京科美生物技术有限公司提供的试剂盒。操作严格按照试剂说明书进行操作
1.2.2统计学方法 ：采用SPSS15.0软件对所有数据进分析处理。计数以均数±标准差（X±s）表示，计量采用t检验，P
2 结果
检测结果显示，肝硬化，重度慢性肝炎以及原发性肝癌的肝纤维四项明显升高，但轻度和中度慢性肝炎患者升高程度不明显，检测结果与对照组比较差异均具有显著性（t值分别为3.324， 3.297， 2.941， 2.411， 2.345，P值均小于0.05）。见表1.
3讨论
肝纤维化是指各种致病因素引起肝脏损害及炎性反应，在修复过程中导致肝脏细胞外基质异常增多。肝纤维化是大多数慢性肝病所共有的病理特性，是各种慢性肝炎向肝硬化发展的主要中间环节。血清肝纤维化标志物水平，肝组织纤维化程度及炎性反应活动度有良好的相关性，于肝脏损害程度及肝组织纤维化发展的阶段性密切相关[5]。通常肝纤维化检测的方法有三种，即病理学检测，影像学检测和血清学检测。目前，病理学检测依然是肝纤维化检测的“金标准”，而影像学和血清学作为辅助诊断的项目。虽然病理学检测的认可度最高。但是因为具有创伤性，并且技术难度和风险度都很高而致使其应用受到限制，特别是不能够监测患者的病情。影像学的发展对肝纤维化的诊治非常地有意义，但是存在分辨率普遍偏低的情况，这对早期肝纤维化的发现和诊治失去价值，从而使病人失去肝纤维化***的宝贵时间，血清学检测则是对病理学检测和影像学检测最有效的补充，不仅可以监测病人病情，而且对早期肝纤维化的发现和***非常有价值。此次研究表明肝纤维四项在不同程度肝病患者中的指标与健康对照组之间存在显著性差异，且不同病情程度的患者之间肝纤维四项的指标也不同。因此肝纤维四项的检测对肝纤维化的病人的诊治有着很高的价值。
参考文献
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化学发光篇10
关键词：化学发光检测；肺癌；消化道类肿瘤；临床意义
近年来，各类医学检测技术水平在不断地飞速发展，对于各种在以往比较那解决的疾病也提出了诸多诊断和***的手段，为人们的健康水平的提高提供了极大的保障，由于人们受到不健康的生活习惯以及污染严重的生活环境的影响，肺癌的发病率在逐渐的增加[1]，不过随着人们对于癌症的认识的逐渐深入，发现肿瘤标记物在癌症的诊断中具有比较重要的意义，所谓的肿瘤标记物就是指癌症患者的癌组织中会出现免***球蛋白、各种酶以及激素，这些与癌症相关联的的物质就被称为肿瘤标记物[2]，而采用化学发光法进行免***分析是目前比较先进的一种高效检测方法，本文选择自2012年8月～2013年7月来我院进行***的癌症患者60例和60例健康人作为研究对象，研究分析化学发光法检测糖类抗原CA153、CA125、CA199在肺癌及消化道其他肿瘤中的临床意义，现做报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料 本为选择自2012年8月～2013年7月来我院进行***的癌症患者60例和60例健康人作为研究对象，分别命名观察组和对照组，其中观察组患者中，男性患者32例，女性患者28例，年龄42～75岁，肺癌患者30例（其中良性肿瘤18例，恶性肿瘤12例），其他癌症包括胰腺肿瘤12例、胃癌18例（其中良性肿瘤15例，恶性肿瘤15例；对照组中男性30例，女性30例，年龄43～74岁，两组人员在年龄及性别方面没有显著的差异，具有可比性。
1.2 检测方法 分别向对照组和观察组于空腹时取其外周静脉血3ml，放置在没有抗凝剂的真空管中，即刻在转速为1500～2000的分离器上进行血清的分离，然后放在零下20℃的冰箱中保存以备检测使用[3]。
采用的检测仪器是从深圳新产业生物医学工程公司采购的全自动化学发光免***分析仪，并分别配有CA153、CA125、CA199的试剂，按照说明书和医学操作要求对血液样本进行检测。
1.3观察指标 分别对比两组患者的CA153、CA125、CA199的结果并分析检测结果的阳性，其中阳性的判断标准是CA153>25U/ml、CA125>35U/ml、CA199>37U/ml。
1.4统计学分析 采用SPSS17.0软件处理实验数据，计量资料使用x±s表示，采用t检验；计数资料使用χ2检验。P
2结果
检测结束后，对两组患者的检测结果进行统计，见表1。
可见，恶性肺癌患者的CA153、CA125、CA199水平都明显的高于良性肿瘤患者，而观察组患者的CA153、CA125、CA199水平明显高于对照组，见表2。
可见，恶性其他呼吸道肿瘤患者的CA153、CA125、CA199水平都明显的高于良性肿瘤患者，而观察组患者的CA153、CA125、CA199水平明显高于对照组。
3讨论
多年来医学界相关学者都在致力于癌症的研究，肿瘤标记物是肿瘤细胞中的组织出现代谢异常后产生的一种生化学物质，导致癌症患者的体液、排泄物以及组织发生量变或者质变，在目前的临床中，肿瘤标志物在肿瘤的诊断与发现、高危肿瘤患者的筛选、恶性以及良性肿瘤的分类排查、肿瘤恶化程度的鉴定以及肿瘤***效果的跟踪等方面都具有非常重要的意义[4]，在利用肿瘤标记进行肿瘤的诊查中，化学发光检测法是其中应用比较广泛的一种，特异性表现比较明显，肺癌以及其他消化道肿瘤给患者带来了极大的伤害，因此，对其的了解在医学中意义深远。
在上世纪80年代，国外医学家通过杂交瘤技术获得了肿瘤特异性大分子糖蛋白抗原CA[5]，其中CA125是从上皮卵巢癌抗原中检测出并克隆的抗体OC125与糖蛋白的结合物，是癌症患者的组织中一种特异性极强的标志物，通常用于对癌症的诊断和检测，CA153是肺癌患者的组织碎片以及细胞质中的糖类抗原物质，CA199是一种存在于正常人的胚胎细胞和癌症患者的组织细胞中的一种糖类抗原，同CA153及CA125同样是肺癌患者组织中具有特异标志性物质，邱娟[6]等人认为，肺癌及其他消化道癌症患者的血中的CA125的水平往往会较正常人高出许多，可以用于对肺癌以及其他消化道类肿瘤的诊断与检测，这与本文的研究结果一致。
本研究对于肺癌患者来说，恶性肺癌患者的CA153、CA125、CA199水平明显高于良性肿瘤患者，同时，与正常人相比，肺癌患者的CA153、CA125、CA199水平远远高于正常人的CA153、CA125、CA199水平，同样的，在其他消化道类肿瘤患者中，也存在这样的规律，这就说明化学发光法检测CA153、CA125、CA199对于肺癌及其他消化道类肿瘤的诊断中具有积极的作用，在今后的临床诊断中应多方面推广。
参考文献：
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