学文网检验试剂篇1
[关键词] 甘油三酯；体外诊断试剂
[中***分类号]R446.11+2 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2008）09（c）-084-02
甘油三酯(triglyceride, TG)是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，参考范围为4.5 mmol/L(400 mg/dl)时，即可诊断为高甘油三酯血症。
TG升高可见于以下疾病：家庭性混合型高脂血症、糖尿病、糖原累积症、甲状腺功能不足、肾病综合征、妊娠、急性胰岛炎(高危状态)；TG降低见于以下疾病：甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能减退、肝功能严重低下。
现在医院普遍采用体外诊断试剂盒来检测病人血清中的甘油三酯浓度，为比较市场上甘油三酯试剂盒检验结果的准确度及配方差异，笔者进行了如下研究：
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
半自动生化分析仪(SECOMAM公司生产，型号BASIC)；电热恒温度水浴锅；紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司，型号TU-1901)。甘油三酯试剂盒(5个不同厂家生产，均为GOD-PAP法，依次编号为1~5号)，各试剂盒说明书中主要配方见表1；多项液体生化质控血清(四川省迈克科技责任有限公司生产，批号0807041)；21项液体生化质控品(中生北控生物科技股份有限公司生产的，批号070871)。
*双试剂中试剂1成分
LPL：脂蛋白脂肪酶；GK：甘油用甘油激酶；GPO：磷酸甘油氧化酶；POD：过氧化物酶；4-AAP：4-氨基比林；ATP：三磷酸腺苷
1.2 方法
1.2.1 实验原理用高效的微生物脂蛋白脂肪酶(LPL)使血清中的TG水解成甘油与脂肪酸，将生成的甘油用甘油激酶(GK)及三磷酸腺苷(ATP)磷酸化，以磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化3-磷酸甘油(G-3-P)，然后以过氧化物酶(POD)、4-氨基比林(4-AAP)与4-氯酚(三者合称PAP)显色，测定所生成的H2O2，故本法简称GPO-PAP法。
1.2.2 实验方法①选择5个不同厂家的甘油三酯试剂盒，分别按说明书要求及企业标准进行试验。其中半自动生化分析仪进样量为0.8 ml。说明书规定进样量小于0.8 ml的，按说明书规定等比例放大进行试验。②以蒸馏水调零，用紫外分光光度计测定其试剂空白吸光度。③测定其线性范围，计算回归系数r值。④用试剂盒测定同一质控品，比较其准确度差异。
2 结果
2.1 试剂空白吸光度
测定结果见表2。
2.2线性范围
测定结果见表3。
2.3 准确度
准确度的测定使用四川省迈克科技责任有限公司生产的多项液体生化质控血清，靶值为1.37 mmol/L。可接受范围为1.03~1.71 mmol/L。准确度计算公式：
1号试剂盒使用中生北控生物科技股份有限公司生产的21项液体生化质控品进行复测，靶值为：1.34 mmol/L，（靶值±2SD）范围为：1.07~1.61 mmol/L。检测结果为：1.06 mmol/L，不准确度：-23%。
3 讨论
GOD-PAP法作为一种常规使用的甘油三酯的检测方法，其试剂空白吸光度、线性及准确度均在一个比较稳定的范围内，但是部分试剂盒的准确度存在一定差异。
其中，1、4、5号试剂盒为双试剂，2和3号试剂盒为单一试剂。通常意义上，双试剂法是为了消除血清中的游离甘油(FG)的干扰，将LPL和4-AAP组成试剂2，其余部分组成试剂1。因无LPL，TG不能水解，FG在GK和GPO的作用下反应，生成H2O2，因为体系中不含4-AAP，Trinder反应不能完成，不显色；加入试剂2后，TG反应生成红色苯醌亚胺。
但本次试验所用的双试剂法的试剂盒，均未把LPL和4-AAP单独组成试剂2(表1)，其中，1号和4号试剂盒是把所有工具酶混合作为试剂2，5号试盒是将4-AAP和POD作为试剂2，二者均不能达到双试剂法消除游离甘油干扰的目的。
GOD-PAP法试剂盒的主要有效成分中，各种工具酶占了很大比例。各种工具酶的单位活力比、反应最适pH、温度及热稳定性等均有一定差异。表1按各试剂盒的说明书列出了其主要成分的浓度(双试剂为混合后浓度)。可以看到，单一试剂的工具酶活力比双试剂工具酶的浓度大得多，尤其是LPL和GK，最大差距达到167倍。与其他试剂盒比较，1号试剂盒的工具酶活力最低，这也是其不合格的一个重要因素。
贮藏条件对甘油三酯试剂盒的影响很大，长时间放置在高于贮藏条件规定的温度下，会导致试剂中工具酶活力下降。其中1号和4号试剂盒把所有的工具酶混合作为试剂2，在贮藏时有利于保持工具酶的活性。检测本地区1号试剂盒同厂家不同批号的甘油三酯试剂盒，同样存***性范围和准确度的偏移；但使用原厂重新送样同批号试剂盒复检，则能达到标准规定的要求，说明造成酶活力降低、准确度偏移的原因，很可能来自于运输途中贮藏条件的不规范。
试验温度对检验结果也有很大影响，说明书规定的37℃必须严格控制，时间太短或太长，温度过高或过低都会造成检验结果的不准确。试验温度偏低时，检测值普遍偏低；而线性范围和准确度偏移较大的1号试剂盒，如果延长反应时间(通常为10 min)，平行操作，延长至孵育20 min后再检测，准确度项检测值无明显差异，线性范围的r值可增加到0.994 6。
[参考文献]
[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验手册[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006.479-483.
检验试剂篇2
[关键词] 医院制剂；抑菌作用；微生物限度检查；方法验证
[中***分类号] R95 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2015）19-51-03
[Abstract] Objective To establish microbial limit test of 4 hospital preparations. Methods 4 hospital preparations was received microbial limit test according to microbial limit test in appendix I of 2010 edition of Chinese Pharmacopoeia. Results Microbial limit test of 4 hospital preparations was established by experiment. Conclusion Compound Dachengqi Oral and Detoxification Oral can adopt routine methods to test microbial limit.Fu Liu liniment and Compound tincture pseudolaric can adopt membrane filtration method to test microbial limit.
[Key words] Hospital preparations；Bacteriostasis；Microbial limit test；Verification test
四种医院制剂均为含多种成分的复方制剂，处方组成比较复杂，其中呋柳擦剂与复方土荆皮酊处方中均含有水杨酸、苯甲酸成分，具有抗表皮真菌、止痒作用，用于手癣、脚癣、体癣等各种皮肤癣症。由处方和功效可知，这两种制剂具有一定的抑菌作用，含抑菌成分的医院制剂的微生物限度检查，必须先消除供试液的抑菌活性，然后再根据中国药典规定的方法进行检查[1-3]。复方大承气口服液是由大黄、芒硝、赤芍、桃仁、莱菔子、厚朴丝等药材组成，具有化瘀行气、通里攻下的作用，用于***各型肠梗阻。防风解毒口服液主要由白芷、防风、荆芥、紫苏叶、桂枝、桔梗等药材经加工而成，具有发散风寒、辛温解表的作用。医院制剂没有规定具体的微生物限度检查方法，根据国家药典委员会的要求，按照《中国药典》2010年版一部附录微生物限度检查法，分别对四种医院制剂进行了方法的验证，为规范医院制剂的微生物限度检查方法，提供了科学的依据。通过验证，复方大承气口服液、防风解毒口服液可用常规法进行微生物限度检查。呋柳擦剂与复方土荆皮酊细菌计数采用薄膜过滤法检查，霉菌和酵母菌计数采用常规法检查。
1 资料与方法
1.1 仪器
HTY-2000 集菌仪（杭州泰林医疗器械厂）；GH-6000隔水式培养箱（天津泰斯特仪器有限公司）；LRH-250-MS霉菌培养箱（韶关泰宏医疗器械有限公司）；DF3-3红外线高温干燥箱（北京兴争仪器设备厂）；LDZX立式压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）。
1.2 菌种
大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC（B）44102]、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC（B）63501]、金黄色葡萄球菌（Staphy lococcus aureus）[CMCC（B）26003]、白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC（F）98001]、黑曲霉（Aspergillus niger）[CMCC（F）98003]均购于中国药品生物制品检定所。
1.3 培养基及试药
营养琼脂、玫瑰红钠琼脂、营养肉汤、改良马丁、改良马丁琼脂、胆盐***糖、pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液（批号分别为131218、1312192、131016、1309122、120113、140110、140124）均购自中国药品生物制品检定所。
1.4 样品
呋柳擦剂（北戴河疗养院，批号：20120917）、复方大承气口服液（第261医院，批号：121022）、复方土荆皮酊（白求恩国际和平医院，批号：20120524）、防风解毒口服液（第261医院，批号：121105）。
2 方法
按照《中国药典》2010 年版一部[4]附录XⅢ C 微生物限度检查法进行验证试验。
2.1 菌液的制备
（1）取经37℃培养18～24h的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤培养物1mL， 用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1mL含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
（2）取经25～28℃培养18～24h的白色念珠菌的改良马丁液体培养物1mL，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1mL含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
（3）取经25～28℃培养5～7d的黑曲霉改良马丁琼脂斜面培养物，加入3～5mL 0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，吸出孢子悬液，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
2.2 供试液的制备
分别取供试品lOmL，加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100mL，摇匀，制成1∶10的供试液。
2.3 细菌、霉菌及酵母茵计数方法的验证
试验组（1）常规法：取1∶10的供试液1mL和50～100cfu试验菌，注入平皿中，每皿加15～20mL营养琼脂培养基，摇匀、培养、观察结果。各试验菌株的回收率结果，见表l。（2）培养基稀释法：分别取1∶10的供试液0.5、0.2mL和50～100cfu试验菌，注入平皿中，每皿加15～20mL营养琼脂培养基，摇匀、培养、观察结果。（3）薄膜过滤法：取1∶10的供试液10mL加入薄膜过滤器中，全量通过薄膜后，再用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，冲洗量为100 mL/膜，在冲洗液中加入50～100cfu试验菌，滤干，将滤膜贴至营养琼脂培养基平板上，培养观察结果。
菌液组：除不加供试液外，其余操作同试验组。
供试品对照组：除不加试验菌外，其余操作同试验组。
稀释剂对照组：用稀释液代替供试液，其余操作同试验组。
3 结果
3.1 常规法
从表1的回收率试验结果可以看出：采用常规法，复方大承气口服液和防风解毒口服液对5种试验菌株的回收率均>70%，无明显抗菌活性，细菌、霉菌及酵母菌计数均可用常规法检查；复方土荆皮酊对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌和白色念珠菌的回收率均
3.2 培养基稀释法
从表2的回收率试验结果可以看出：采用培养基稀释法后，复方土荆皮酊对对枯草芽胞杆菌的回收率
3.3 薄膜过滤法
从表3的回收率试验结果可以看出：采用薄膜过滤法后，复方土荆皮酊和呋柳擦剂对金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌的回收率均>70%，消除了抑菌活性，细菌计数均可用薄膜过滤法，霉菌和酵母菌计数采用常规法检查。见表3。
4 讨论
医院制剂疗效确切，价格低廉，深受群众欢迎，因此，质量控制尤其是微生物限度检查显得尤为重要[5-8]，只有建立科学的检查方法，完善、提高医院制剂的质量标准评价体系，才能有效提高医院制剂的监管水平。
呋柳擦剂和复方土荆皮酊的处方中均含有水杨酸和苯甲酸，这两种成分对微生物的生长有一定的抑制性，药品中污染的微生物在这些成分的影响下有可能检不出，但是当抑菌成分消除后或浓度降低时，这些微生物便可复苏并繁殖，如果按照常规法进行检查，可能会造成检验结果的漏检或者误判[9-16]。因此分别采用培养基稀释法、常规法和薄膜过滤法逐一进行了验证，来降低或消除抑菌成分对试验的干扰，以证明所采用的方法适合于该药物微生物限度检查。试验中发现，在制备呋柳擦剂和复方土荆皮酊的供试液时，由于处方中均含有水杨酸和苯甲酸，加入稀释液后易产生絮状沉淀，因此应充分摇匀保证试验的平行性和有效性。在稀释菌液时采用了旋涡混悬器进行混匀，这种方法本研究在以往的文献中尚未查到，是在反复的试验、思考中摸索而来，此法耗时短，方法简单，不需用吸管反复吹打，降低了劳动强度，提高了工作效率。
[参考文献]
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检验试剂篇3
关键词：临床生化检验;质控管理;试剂;使用评价
当前，临床生化检验已经成为临床诊断、临床***过程中的重要前提与参考指标，检验结果的精准性与实时性直接决定了临床***的整体水平，对于挽救病人生命起着十分重要的意义。临床生化检验通常会受到各种主客观因素的共同影响，导致检验结果出现部分误差，而为了提升其检验效率，必须加强质控管理，强调试剂使用环节的准确性[1]。笔者将2014年5月-2014年5月本院收治的112例病人视作研究对象，将其随机划分成两个组。其中，对照组研究对象行传统临床生化检验措施，而实验组研究对象则采取临床生化检验质控管理措施，期望能够找到提升检验结果准确性的主要方案，现作详细报道。
1.资料及方法
1.1临床资料
选取2014年5月-2014年5月本院收治的112例病人，男女比例：68：44;病人年龄在21-50岁之间，其平均年龄约（32±3.19）岁。将112例病人随机划分成为两个组，组均56例，且两组研究对象在性别与年龄等资料中的对比不存在显著差异（P>0.05），可进行对比。
1.2方法
对照组研究对象采取传统临床生化检验措施，而实验组研究对象则采取临床生化检验质控管理措施，具体如下：
⑴做好相关准备工作。在正式检验之前，检验人员要结合国家规定对器皿及试剂等实验设施进行定期维护，且所有物件都必须具备齐全的合格证书。同时，对检验科室进行规范化改造，及时发现并处理实验室内各种问题，对于发现的不足予以及时完善与补充。此外，严格执行器皿与仪器的消毒操作，已报废或损坏的器皿与试剂，必须予以及时处理，防止出现实验室安全事故。
⑵检验人员不断提升自身操作技能。临床生化检验质控管理属于技术型工作项目，需要投入足够的人力、物力以及财力。部分操作人员认为该工作项目存在着精神包袱，这并不利于提升质控管理整体操作水平。鉴于此，在实际操作环节，需不断提升检验人员综合素质，予以定期在岗培训，以此方式提升其思想素质，督促其不断转变对质控管理工作的传统观念，从而达到提升确诊效率的目标。此外，还应不断培养检验人员的职业素养与责任意识，使其准确对待自身工作，并始终保持饱满的工作情绪，严格按照既定标准执行检验操作，确保试剂、器皿、仪器以及数据的真实可靠性。
⑶对检验结果进行客观对比。为了确保检验操作程序的准确性，还需采取辅手段对结果进行鉴定，以此方式提升数据的可靠性与准确性。而对检验结果进行客观对比，通常包括三种类型：其一，黄胆与尿三胆对比;其二，血糖指标与尿糖指标对比;其三，肝功能的浊度与血清蛋白数据对比。这种方式能提升结果的可靠性，还能找出各种错误结果，防止医疗事故的发生。
⑷组建质控管理部门。质控管理部分主要承担评定实验结果的任务，通过制定规范性文件，要求检验部门严格按照文件内容执行。对于出现的各种医疗损失，需予以针对性制裁手段，确保临床生化检验操作程序实现规范化、合理化目标。
1.3统计学分析
采取SPSS 18.0统计学软件分析以及处理本组研究数据，通过（X±s）代表一般资料，通过χ2检验计数资料的对比，组间数据对比差异明显，具有统计学意义以P<0.05表示。
2.结果
经检验后发现，实验组研究对象的异常率为3.57%，而对照组研究对象的异常率为44.64%，组间比较存在着明显差异（P<0.05），详见表1。
表1 两组研究对象的检验结果比较 （n%）
有表1可知，两组研究对象在样品的误差值、时效性以及重现性等方面的比较也存在差异（P<0.05）。
3.讨论
临床生化检验质控管理操作环节中，实际使用评价也是其中较为重要的一个流程。一般情况下，试剂使用程序必须严格按照相关规定与标准执行，且试剂必须在检测项目内通过之后才能投入至临床检验中[2]。试剂使用评价即对其使用程序、稳定程度、使用效果等方面进行客观评析。
就目前而言，临床生化检验***控制管理环节所涉及到的检验项目包括谷氨酰转肽酶、总胆固醇标准值、谷丙转氨酶、血清总胆固醇、甲状腺球蛋白、天门冬氨酸氨基转移酶等[3]。对这些项目进行检验时，若其准确度与精密度达到既定标准，则表明该试剂可投入至临床生化检验操作过程中。而为了提升检验试剂的整体使用价值与使用效率，还需对其进行日常维护，首先需要严格执行除污操作，以防试剂被感染，其次需要观察与检测试剂性状，查看其是否出现异常状态，除此之外还需严格把握试剂的添加量，确保试剂使用总量符合相关要求，从而不断提升其利用价值。
本院临床生化检验所选用的试剂由武汉某生物公司所提供，其试剂在敏感性方面具有明显优势，且存在着一定的特殊性，通常在检验完一定标本后会出现变化，其反应曲线的数值上升至10点之后不会继续上升，反而直接返回至原值。而给予实验组研究对象临床生化检验质控管理措施之后，其异常率为3.57%，且实验组研究对象在样品的误差值、时效性以及重现性等方面均优于对照组，组间比较差异较为显著（P<0.05）。由此可见，临床生化检验实践过程中，检验人员要结合试剂的具体变化情况来控制其使用量，确保试剂在整个检验程序中始终处于新鲜状态，从而达到提升检验结果有效性与准确性的目标。
经研究表明，临床生化检验质控管理及试剂使用评价可在一定程度上降低偏差的出现，在提升了时效性的基础上，最大程度上缩小了误差值，对于提升诊断结果的精准性、确保机体***环节的安全性具有重要意义，有效避免了检验结果中显著异常情况的发生，取得了理想效果。但是，在具体操作环节，还需检验科不断提高操作程序的规范性，确保所有检验项目均按照国家标准进行，从而达到提升临床诊断精准性的整体目标。
参考文献：
[1]潘国刚，滕元姬，黎作茶，黄艳新，李如锟.适应临床检验技术的发展 做好临床生化检验实习教学工作[J].右江民族医学院学报，2012，1（1）：86-88.
检验试剂篇4
关键词：分光光度法；甲醛；不确定度；检测准确性
甲醛是一种无色、具有强烈刺激性气味的气体,易溶于水、醇和醚，是室内环境的主要污染物之一。甲醛已被世界卫生组织列为可疑致癌和致畸形物质，它对人体的健康有很大危害，长期接触甲醛，能引起鼻腔、口腔、皮肤及消化道的癌症，甲醛的环境污染已引起人们的高度重视。GB50325-2010《民用建筑工程室内环境污染控制规范》中规定了民用建筑工程室内空气中甲醛的浓度限量和检测方法，甲醛的检测应符合现行国家标准GB18204.26-2000《公共场所空气中甲醛测定方法》中酚试剂分光光度法的规定。对该方法的测量不确定度进行正确评定，不仅具有一定现实意义，而且对进一步提高检测精度也有很大帮助，笔者根据***F1059-1999《测量不确定度评定与表示》对此进行了评定，同时也对检测准确性一并进行了检验。
1 测量原理、数学模型
空气中甲醛与吸收液中的酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物，从而可以根据颜色深浅，在规定波长630nm处比色定量，根据吸光度值确定被测样品中甲醛的含量。
根据朗伯-比尔定律：A=kcL（A：物质的吸光度，k：物质的吸光系数，c：物质的量浓度，L：液层在光路中的长度），通过对空白吸收液及一系列已知甲醛含量（x）的标准溶液吸光度的测量，得到对应系列吸光度（y），由此系列数据拟合线性回归方程y=a+bx，根据该线性关系得出被测量的数学模型，
x：甲醛溶液的浓度，μg
y：甲醛溶液的吸光度，A
a、b：线性回归方程的截距及斜率
2实验数据
2.1标准系列
依据GB/T18204.26-2000采用甲醛标准样品 (编号204509)配制标准含量系列，使用7230G型分光光度计测定吸光度，以甲醛含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线，数据见表1。
表 1
2.2待测样品
本次试验采用甲醛标准样品 (编号204516)，按照证书要求准确移取浓样10mL于250mL容量瓶中,加入12.5mL酚试剂吸收液原液,用纯水定容得稀释后溶液，移取1.0 mL作为待测样品，与标准系列同样处理。重复测定6次吸光度，由标准曲线得出样品中甲醛含量，对此进行测量不确定度的评定。待测样品数据见表2。
表 2
3不确定度来源分析
3.1绘制标准曲线引入的相对标准不确定度
(1)回归曲线引入的标准偏差
(2)斜率引入的标准偏差
(3截距引入的标准偏差
3.2配制样品时引入的相对标准不确定度
(1)标准样品引入的相对标准不确定度
(2)玻璃量具引入的相对标准不确定度
3.3测量重复性引入的相对标准不确定度
3.4使用测量仪器引入的相对标准不确定度
4标准不确定度分量的评定
4.1绘制标准曲线引入的相对标准不确定度
根据标准系列表1数据拟合线性回归方程，得y=0.3798x+0.0017,其中b=0.3798,a=0.0017,相关系数R2=0.9998，符合要求可以进行线性回归分析。
被测量x的数学模型为： ，因此可由y，a，b三个值的不确定度求出被测量x的不确定度：
灵敏系数： ，具体计算时式中的y为x代入回归直线算出的值，计算如下：
（1）回归直线的标准偏差（即y残差的标准偏差Sy/x）
式中 为仪器各点响应值； 为回归直线的计算值；n为测点数目，本实验为7, m为每测点重复测量次数，本实验为1。根据表1数据计算如下：
灵敏系数
（2）斜率的标准偏差（即Sb）
,
灵敏系数
（3）截距的标准偏差（即Sa）
灵敏系数
（4）由上述分量合成标准曲线的标准不确定度:
应用该曲线进行本次检测时,样品中甲醛含量最佳估计值为1.420 ,因此标准曲线引入的相对标准不确定度为：
4.2配制样品引入的相对标准不确定度
4.2.1标准样品引入的相对标准不确定度
根据甲醛标准样品证书(204509)可知,样品标准值为1.43mg/L,不确定度为±0.11 mg/L,配制样品引入的相对标准不确定度为:
4.2.2玻璃量具引入的相对标准不确定度
配制过程中使用的玻璃量具主要有单标线容量瓶（100mL、250mL）、流出式移液管（1 mL）。相关检定证书未提供具体容量偏差，只给出符合***G196-2006《常用玻璃量器检定规程》中A级的结论，因此忽略实验室温度等影响因素,依照***G196-2006选取标准温度20℃时的规定容量允差作为计算依据，按均匀分布属B类标准不确定度评定。
（1）容量瓶（100mL）
标准不确定度为 ，相对标准不确定度为
（2）容量瓶（250mL）
标准不确定度为 ，相对标准不确定度为
（3）移液管（1 mL）
标准不确定度为 ，相对标准不确定度为
由以上因素引入的相对标准不确定度为：
4.3测量重复性引入的相对标准不确定度
测量覆盖本方法的全过程,配制样品、检测、计算,按A类标准不确定度评定，根据表2数据计算如下:
单次测量结果的标准偏差:
测量结果平均值的相对标准不确定度:
4.4分光光度计引入的相对标准不确定度
实验使用的7230G分光光度计的τ/A转换误差为±0.004A，数字式测量仪器对示值量化导致的不确定度按均匀分布属B类标准不确定度评定。
待测样品标准不确定度为
相对标准不确定度为
5 合成相对标准不确定度
6 扩展不确定度
取置信水平p=95%,k=2,则
7 样品检测结果
以相对扩展不确定度表示,样品检测结果为：
C=1.42±0.23mg/L,置信概率95%。
根据甲醛标准样品证书（编号204516）移取浓样10mL于250mL容量瓶中,用纯水定容，稀释后溶液浓度为1.43±0.09 mg/L，参照合格评定国家认可委员会能力评价规则可得：
， ≤2,结果满意
8 结论与说明
8.1样品检测结果满意，说明实验室该项检测能力合格，检测数据准确、可信。
检验试剂篇5
[关键词]CA-1500血凝仪； 缓冲液； 研制和应用
[中***分类号] R446.11[文献标识码] B[文章编号] 1005-0515（2011）-02-239-01
纤维蛋白原（FIB为临床凝血试验中最常用检测项目之一。CA-1500血凝仪测定纤维蛋白原缓冲液多采用原装进口试剂，价格较高，自制缓冲液价格低廉，其效果如何已成为实验室中的新课题[1]。本文参照了美国临床实验室标准委员会的EP9-A文件标准[2]，对比检验了我院自制纤维蛋白原缓冲液与原机配套试剂的理化性质，准确度，精密度及缓冲能力方面，显示理化性质及检验准确等方面与原试剂基本一致，可取代使用，现报道如下：
1 材料与方法
1.1 仪器
sysmexCA-1500全自动血凝仪、电导率测定仪、酸度计等。
1.2 试剂
原机佩戴的配套纤维蛋白原含量测定用试剂盒，勾玉美国的DADE公司，批号为540219,标准品批号为502576c，质控品批号为528186. pH值为7.3，电导率为15.52，Na离子浓度为146mmol/L，Cl离子浓度为153mmol/L。
1.3 缓冲液制备方法[3]
缓冲液制备标准规格按照中华人民共和国药典（7版），以原装试剂为标准钠氯离子浓度标准制备：氯化钠7.8g/L，巴比妥钠5.27g/L，医用明胶0.5g/L。pH值为7.31，电导率为15.52，Na离子浓度为148mmol/L，Cl离子浓度为155mmol/L。
1.4 标本来源
所有标本均来自与我院2010年10月份门诊和住院患者的凝血测定系列标本，共86份。
1.5 测定比较方法
本组冻干质控品的复溶之后，分别在小样品杯中冷冻保存，每天与原装配套试剂和自配试剂测定，每次测定2次，取平均值，连续测定10天，测算自配试剂的精密度。并将标本与两试剂进行Fbg检测，对比起显著性检验结果。
1.6 统计学方法
数据均用SPSS17.0统计分析软件包进行处理。计量数据以x±s表示， 采用t检验，计数数据采用χ2检验。且P
2 结果
2.1 精密度
自配试剂与原装试剂测定结果精密度比较见表1，由此可见两试剂检验结果基本一致，差异无统计学意义（P>0.05）。
表1自配试剂与原装试剂测定结果精密度比较
2.2 显著性检验
自配试剂和原装试剂对血液标本检测结果显示，原装试剂测定Fbg（s）均值为8.83±2.713，Fbs（c）均值为2.443±0.643。自配试剂测定Fbg（s）均值为8.81±2.62，Fbs（c）均值为2.441±0.721。
2.3 缓冲能力
标准液倍比稀释后分别行自配试剂和原装试剂的标准曲线，统计显示相关系数r为0.998、-0.997。由此可见两组试剂的缓冲能力差异无统计学意义（P>0.05）
3 讨论
近年来随着现代医学关于止血和血栓形成的机制认识不断深入，在实验室内开展止血、血栓相关指标检测的项目越来越多。纤维蛋白原（FIB）为临床凝血试验中最常用检测项目之一，对于出血性的疾病诊断、***和预后等各方面都有着重要意义，其测定方法的也颇多。CA-1500血凝仪采用的是散射光比浊法，操作简单，标准用量少，结果准确[4]，但其缓冲液多采用原装进口试剂，价格较高，自制缓冲液价格低廉，其效果如何已成为实验室中的新课题。
过去检验学文献中关于进口试剂的配制有过多例介绍，自制缓冲液用生理盐水直接代替效果不佳[5]。本院参照参照了美国临床实验室标准委员会的EP9-A文件标准，对比检验了我院自制纤维蛋白原缓冲液与原机配套试剂的理化性质，准确度，精密度及缓冲能力方面显示，自配试剂在选材合适的基础上严格操作，可以较易达到原装试剂的pH值、电导率、钠氯离子浓度等理化性质[6]。本文采用的氯化钠，巴比妥钠，医用明胶制备缓冲液在显著性检验结果与缓冲能力、精密度比较效果与原状试剂差异无统计学意义，但价格较低，完全可以替代进口原装缓冲液的使用，大大节省了资源，值得临床推广使用。
参考文献
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[3] 戴隽．新鲜血在校准血液细胞分析仪的应用[J]．江西医学检验，2003,21(3)：197-205．
[4] 胡意，钟伟祥，万腊根，血凝仪检测系统精密度的评价方法与结果分析[J]实验与检验医学,2009,27(5):491-492.
[5] 冯仁丰主编．临床检验质量管理技术基础[M]．上海：上海科技文献出版社,2007，9：89．
检验试剂篇6
酶联免***吸附试验(ELISA)是检测乙肝表面抗原和乙肝两对半较常用的检测方法,实验中弱反应性结果在不同实验室、不同试剂和方法学之间往往有较大的差异。我们按照样本的吸光度(A)值高低将弱反应区分为可疑、弱阳性两个部分进行研究,为正确了解弱反应结果实质提供可靠的依据。
1 材料与方法
1.1 样本来源2009年1～12月本院住院、门诊患者及体检者血清样本5400份。
1.2 仪器深圳雷杜RT-6000酶联仪;雷杜RF-3000洗板机、Abbotti2000SR免***荧光分析仪。
1.3 试剂科华公司HBsAgELISA定性检测试剂、Abbott公司HBV定性检测试剂HBsAgELISA定性检测试剂购自金豪公司;1ng/ml HBsAg定值参比血清由卫生部临床检验中心提供。
1.4 方法和检测流程先用科华公司的检测HBV血清标志物(HBVM)再用Abbott试剂对弱反应性样本进行定量的检测;定性和定量的结果不符合者采用金豪公司定性试剂进行验证,二种定性试剂均有反应者判断为有反应性,反之阴性。将1ng/ml定值参比血清稀释成0.5、0.1、0.05、0.01ng/ml系列浓度,分别采用科华公司的试剂和Abbott试剂重复检测5次,取平均值作为其最终检测的结果。
1.5 判断标准
1.5.1 HBsAg定性可疑的标准将 ELISA定性检测A值为0.063～0.126(s/co0.6～1.2)范围定义为灰区(以“0”表示),对该范围标本进行2份的复检,其中至少有一份为灰区者为可疑,反之为阴性(试剂阴性对照要求A≤0.05,A=0.065是因洗板不充分造成半颜色反应的最低吸光度值)。
1.5.2 HBsAg定性弱阳性标准将ELISA定性检测A值为0.142～0.2(s/co1.2～1.9)范围的标本进行2份复检,2份检测A值均在该范围弱阳性(以“±”表示)。其中一份在该范围为可疑,2份均无反应则报告为阴性。
1.5.3 HBsAg定量的阳性标准≥0.05IU/ml 有反应性,HBsAg含量在1.0IU/ml以下者2份进行复检,如只有一份有反应性须根据中和实验的结果确定阴阳性,2份均无反应则报告阴性。
1.5.4 HBsAg中和试验确定阳性标准测定同一份标本加入和未加中和抗体的HBsAgA值,其中和率(%)≥50%为HBsAg确定实验阳性。
2 结 果
2.1 科华公司ELISA定性试剂检测结果 5400份样本中HBsAg可疑者48份(0.89%),弱阳性41份(0.76%)。
2.2 弱反应样本经Abbott试剂定量检测结果对48份可疑样本和41份弱阳性样本进行定量检测,结果阳性者分别为38份和32份,符合率为79.17%和78.05%,其HBsAg含量x(s)分别为2.18 IU/ml和2.56IU/ml。
2.3 HBsAg定性和定量结果不一致样本分析 对5份HBsAg定性弱阳性而定量阴性标本,采用金豪公司试剂进行验证,结果有2份呈弱阳性,其中1份样本可疑,建议做HBV-DNA定量检测。
2.4 HBsAg中和试验结果上述41份HBsAg定性弱阳性标本中,有3份标本含量在1.0IU/ml以下呈反应性,2份标本为阳性,其1份样本一周后复查仍为阳性。
3 讨 论
HBV普遍将导致常规试剂检测A值降低[1],同时有部分血清HBsAg呈低水平状态存在,因此忽视弱反应性结果尤其是阳性判断值以下的结果将造成该人群的漏检,其次检测试剂阳性判断值的设立方法决定了灰区的客观存在;不同试剂由于使用材料纯度、组合、来源、方法学的不同,以及国产定性试剂检测存在变异系数大[2]等因素均会造成结果差异,也影响到弱反应结果的报告。因此除选择质量较好的试剂、订购长批号试剂,对定性检测过程进行标准化以减少变异系数外,还应根据实验结果设立本实验室合适的灰区和弱阳性标准,并对弱反应样本及少见模式样本进行严格复查,并对结果的解释应结合临床及其实验数据进行综合分析,以免绝对化。
【参考文献】
检验试剂篇7
关键词：反应曲线；临床生化检验；异常结果
在临床中经常用到生化检验来为临床诊断提供必要的依据，这就要求临床生化检验的结果必须准确。在临床生化检验的每一个环节中，都要严格遵守操作规范，提高临床生化检验结果的准确性[1]。反应曲线在临床生化检验中能够对异常结果进行反应，及时发现异常结果，使临床生化检验更加科学。本文对反应曲线对检验仪器、试剂变质、标本检测过程、临床患者标本方面的异常问题进行了分析，现报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料 选取正规厂家生产的、质量合格的生化检测试剂、生化分析仪和校准品，确保其能够通过每天的质检品测验。
1.2方法 通过将临床标本检测、质控品、标准品和试剂空白检测中的正常反应曲线和异常反应曲线进行对比，分析异常反应曲线的特点。反曲线的横轴为时间，纵轴为吸光度，无明显波动、光滑平坦的曲线为正常反应曲线，相反则为异常反应曲线[2]。
2结果
2.1反应曲线对生化检验仪器问题的反应 在进行临床标本碱性磷酸酶在检测过程中，检测结果是224 U/L。此时可以发现，反映曲线在试剂2加入后，呈现出了一个向下峰，反应曲线明显异常。此时再重新检测该标本，曲线无异常波动，检测结果是77 U/L。此时可以对反应曲线的异常原因进行分析，很可能是第一次检测时检测仪器的状态不稳定导致的。在进行临床标本直接胆红素的检测时，反应曲线出现异常波动，此时发现在同时段内进行的其他检测的反应曲线也出现了类似的波动，究其原因可能与光源灯的老化或者不稳定有关系。将光源灯更换之后，反应曲线的异常波动也就消失了。值得注意的是，自动生化分析仪的比色杯是一次性的，因此在分析反应曲线波动原因时可以将比色杯污染问题进行排除[3]。
2.2反应曲线对反应试剂问题的反应 在进行ALP试剂的空白试验中，曾经出现异常的反应曲线。从反应曲线的吸光度来看，达到了20000以上，而按照试剂说明书的规定，8000是试剂空白吸光度的最大标准值。因此，此时可以判断试剂存在失效和变质的情况。将试剂进行更换后再一次进行检测，空白吸光度在8000以内，这就充分说明了反应曲线的异常与试剂的变质有着直接的关系。因此，为了确保试剂的质量，避免因为试剂变质而造成最终检测结果的失真，生化检测部门最好要利用反应曲线，对试剂空白进行严格的周检、月检、季检和年检。通过反应曲线可以对试剂的稳定性进行清晰客观的反应。此外，为了提高检测结果的准确性，还可以在采用固定时间法和动力学，对试剂本身产生的吸光度变化进行扣除。要提高对检测过程中R2的加入对吸光度产生的影响。在不存在脂血、黄疸和严重溶血的前提下，试剂吸光度就是R2加入后的吸光度，二者相互对应。碱性磷酸酶的试剂空白吸光度不超过8000，而天门冬氨酸氨基转移酶和丙氨酸氨基转移酶等的试剂空白吸光度就要在10000以上。在某次生化检验中发现反应曲线出现异常波浪状，而通过对比，该时段的其他检验项目并未出现反应曲线异常的情况，排除仪器异常的可能[4]。此时可以对试剂进行观察，发现试剂中的气泡数量较多，当气泡被试剂针吸到反应杯中后，气泡破裂了，造成了检验结果的异常。在正常情况下，样本成分不会与R1发生反应，反应曲线也不会出现异常波动，而在检测中如果试剂2和S的加入之间，反应曲线出现异常，则可以判断试剂出现异常。
2.3反应曲线对临床标本检测过程问题的反应 在一次检测中发现，对临床标本丙氨酸氨基转移酶的检测反应曲线出现异常，检测结果为0。在加入试剂2之后，反应曲线出现迅速的下降。此时反应曲线的下降可以说明标本中存在过高浓度的丙氨酸氨基转移酶。此时应该对样本进行稀释至15～30倍，才发现反应曲线恢复正常波动水平。在类似的异常现象中，首先要对其他的项目检测结果进行比对，如果***酸脱氢酶、碱性磷酸酶检测结果高于丙氨酸氨基转移酶，则要对其反应曲线进行分析，对样本进行稀释后再进行检测，才能得到准确的检测结果[5]。
2.4反应曲线对临床患者标本方面问题的反应 反应曲线主要是对出现了脂血、黄疸和严重溶血等问题的临床患者标本进行反映。反应曲线的双波长能够避免样本的浊度和颜色影响检测的结果，并补偿电源的波动。双波长可以对样本你的脂血、黄疸和溶血现象进行有效的校准。加入S后，反应曲线就会迅速升高。例如在检测标本存在黄疸时，丙氨酸氨基转移酶的反应曲线就会出现异常波动；在检测标本存在严重溶血时，***酸脱氢酶就会明显增高，***酸脱氢酶反应曲线出现异常波动。如果标本中存在上述情况，必须标注在报告单上，以免对检测结果和医生的诊断产生误导。
3讨论
反应曲线可以将完整的反应过程向用户提供出来，因此其对于问题的发现和解决具有十分大的作用。不同的反应曲线可以将标本、试剂以及仪器的质量等状态综合地反应出来。这样就可以将标本、检测、质量控制、定标过程存在的问题及时的发现，从而对检验结果的准确性具有重要的保障作用，同时还可以有效地避免出现医疗纠纷。通过对反应曲线的分析，可以将常规不易发现的问题找出来出来，通常往往需要分析试剂的定标反应曲线以及空白反应曲线，这样能够有效地防止由于异常情况导致系统误差出现在检测过程中。如果无极端异常结果出现在临床标本中以及质检结果在控，就需要针对其中数个项目反应曲线进行随机的抽取，然后进行分析；如果临床标本出现明显异常的检测结果或者质检结果失控的时候，就必须要对反应曲线进行有效的分析，从而能够将导致问题出现的原因及时的找出来，并且对检验结果进行正确的分析。当然也有一些问题是在反应曲线当初不能被反映出来的，比如由于加入试剂较少或者加入标本较少，导致检测结果出现异常，这时候反应曲线就不会出现很明显的异常。在这种情况下就需要通过对其他途径的利用从而将问题及时的找出来[6]。
总之，由于反应曲线对临床生化检验具有重要的意义，有助于迅速地发现异常结果，提高临床生化检验的准确性。检验人员必须要将其中的每一个环节掌握好，才能够将有价值的参考信息提供给临床***。
参考文献：
[1]田学辉，吴郑琴.反应曲线分析在生化检测中的应用[J].中国社区医师（医学专业），2012，18（1）：99-102.
[2]王宏碧，刘云华，巢玲.OLYMPUSAU2700全自动生化分析仪反应曲线***的意义分析[J].实验与检验医学，2013，18（2）：112-113.
检验试剂篇8
关键词：影响血凝试验；因素分析
【中***分类号】R446.112 【文献标识码】A 【文章编号】1672-3783(2012)08-0118-01
凝血试验是临床工作中最常用的检验项目，同时也是最重要的检验过程，是指导临床正常的***的保障之一[1]，因此如何确保凝血试验结果的准确性也尤为重要。作为凝血功能异常的试验，在出血性疾病的诊断，术前检查中具有非常重要的作用，并且运用的非常广泛。由于凝血试验与一般的检验项目测定不同，其影响因素很特殊。当启动因子被某些因素激活后，就会发生一连串的反应，导致检验结果有很大误差，直接影响最后的诊治过程。因此检验人员必须熟练掌握影响凝血试验的相关因素，同时必须会对检验结果出现很大误差的检测进行校正。
1 一般资料和方法
1.1 资料来源：随机采集2011年1月-2011年10月门诊患者60例，住院部患者280例来进行血凝试验。
1.2 数据来源：对收集到所有的门诊患者和住院部患者样本在检验之前必须认真的校正，对不合格的样本必须返回各个科室进行重新取样。
1.3 仪器与试剂：所使用的仪器为普利生C2000-4全自动血凝仪，试剂为厂家提供的标准的认证的合格配套试剂，以保证每天检验结果的可靠性。
1.4 比对试验：分别对标本量偏少或偏多的38份标本及重新采集符合要求的标本测定血浆凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血酶时间(APTT)值[2]。
1.5 回访调查：对于检验结果有非常可疑的标本，主管医生和检验人员必须进行有针对性的回访调整，同时确定了检验结果有问题的必须重新进行取样以及再次试验。
2 结果
2.1 对所有的收集的标本中共观察了340例，其中住院患者为220例，标本合格为185，标本合格率为84.09%；门诊患者为60例，标本合格为55例，占门诊标本合格率为91.67%。其中不合格标本中标本量偏少的比较多为30例，占不合格的样本的75%；不合格偏多的样本为8例，占不合格样本的20%；样本有凝块的为2例，占不合格的5%。
2.2 回访调查：对所有收集的患者的标本340例中检验结果出现可疑的40例标本进行试验后回访调查发现，有20例患者是正常吃药后采集的标本占50%；有2例标本是放置了时间较长，占5%；有10例患者抽血时不顺利，占25％；其余8例均没有影响因素，占20％。
2.3 比对结果PT的t=2.821，P
3 讨论
3．1 检验人员的素质及其所起的作用：(1)操作者要严格把关，对标本不但要“三查三对”[3]，而且对标本应仔细地检查。对不合格的标本，如有凝块、过多或过少、使用抗凝剂比例不当的均不能接收。(2)对检验标本有缺陷或不能检测的应及时返回临床，并且重新取样。
3．2 标本的采集
3.2.1 采血技术：(1)患者应在空腹条件下处于平静状态。因为***糜血、情绪紧张、剧烈运动会激活或干扰血小板、凝血因子和纤溶酶原等成分。(2)压脉带不应扎的太紧，压迫时间不应过长。压力大及束缚时间过长可影响局部血液的浓缩和内皮细胞释放T-PA，后者可引起纤溶活动增强。(3)采血速度要适当，若太快易产生气泡，使纤溶蛋白原、因子V、因子Ⅲ变性。(5)采血后要立即与抗凝剂混合，但不要用力震荡。(6)采血顺序对试验结果也有影响。PT血样采集顺序第二管、第三管与第一管比较差异有显著性(P0.05)。因此，采多管血样时，凝血试验标本应取第一管。
3.2.2 标本运输以及储存：标本应随采随测，不应放置太长时间，而导致血凝使样本不合格。如需运输，标本应在室温下运送。血浆标本原则上应立即检测，血液一旦离体后即开始变化。凝血试验应在室温保存4h内完成，不能完成者应在4℃冰箱保存，24h内完成。血液离心是凝血试验标本处理的关键步骤，标本离心的相对离心力RCF≥2000g，离心时间不少于15min为宜。
3.2.3 抗凝剂的选择：根据ICSH及lCTH推荐可知，0.019mol／L的枸橼酸钠作为凝血因子检测的首选抗凝剂。血液与抗凝剂的比例应按9∶1混合，为最佳的选择。
3.3 试剂
3.3.1 试剂的选择：试剂的质量是确保结果可靠性的先决条件，试剂的选择一方面要根据所用检测仪器的类型，另外选择试剂应标有ISI值，理论上ISI值越接近1.0越好，ISI值的高低决定INR的精度和试剂的质量。
3.3.2 试剂的使用及保存：(1)试剂在使用时应严格按说明书操作。复溶剂后的试剂不能反复冻融，不用时应加盖并保存在2～8℃条件下；所有试剂均应在有效期内使用[4]。(2)试剂使用中要注意污染的问题，避免如试剂瓶盖错盖，造成交叉污染，用同一吸管或移液头造成试剂标本的交叉污染等。
综上所述，影响凝血测定结果的因素是非常多的，因此要做好对每个凝血检验的质量是有多个方面的。不单是检验人员在检验过程中需要注意检验合理的操作步骤，同时也涉及到护理人员采样本和患者的配合。同时在检验过程中也必须严格控制分析仪器和试剂的检验状态。因此为了保证凝血检验结果的准确性，我们必须对检验过程中各个环节进行严格的控制，尽量使检验结果达到准确，才能更好的服务于临床***。
参考文献
[1] 王瑾．影响凝血试验测定结果的因素分析[J]．检验医学与临床，2008，5(16)；封4
检验试剂篇9
【关键词】无损检测；渗透检验；管板加工
0 前言
无损检测是指在不损害或不影响被检测对象使用性能的前提下，利用材料内部结构异常或缺陷存在引起的热、声、光、电、磁等反应的变化，以物理或化学方法为手段，借助现代化的技术和设备器材，对试件内部及表面的结构、性质、状态及缺陷的类型、性质、数量、形状、位置、尺寸、分布及其变化进行检查和测试的方法。无损检测是工业发展必不可少的有效工具，在一定程度上反映了一个国家的工业发展水平，无损检测的重要性已得到公认。
1 无损检验方法简介与分析
无损检测的特点是：非破坏性、互容性、动态性、严格性以及检测结果的分歧性等。
无损检测方法很多，据美国国家宇航局调研分析，其认为可分为六大类约70余种。但在实际应用中比较常见的有以下几种：
（1）目视检测（VT）：目视检测，在国内实施的比较少，但在国际上非常重视的无损检测第一阶段首要方法。
（2）射线照相法（RT）：是指用X射线或γ射线穿透试件，以胶片作为记录信息的器材的无损检测方法，该方法是最基本的，应用最广泛的一种非破坏性检验方法。
（3）超声波检测（UT）：适用于金属、非金属和复合材料等多种试件的无损检测，但其对具有复杂形状或不规则外形的试件进行超声检测有困难；并且缺陷的位置、取向和形状以及材质和晶粒度都对检测结果有一定影响，检测结果也无直接见证记录。[1]
（4）渗透检测（PT）：零件表面被施涂含有荧光染料或着色染料的渗透剂后，在毛细管作用下，经过一段时间，渗透液可以渗透进表面开口缺陷中；经去除零件表面多余的渗透液后，再在零件表面施涂显像剂，同样，在毛细管的作用下，显像剂将吸引缺陷中保留的渗透液，渗透液回渗到显像剂中，在一定的光源下（紫外线光或白光），缺陷处的渗透液痕迹被现实，（黄绿色荧光或鲜艳红色），从而探测出缺陷的形貌及分布状态。[3]
（5）涡流检测（ECT）：按试件的形状和检测目的的不同，可采用不同形式的线圈，通常有穿过式、探头式和插入式线圈3种。[4-5]
（6）声发射（AE）：声发射技术的应用已较广泛。可以用声发射鉴定不同范性变形的类型，研究断裂过程并区分断裂方式，检测出小于 0.01mm长的裂纹扩展，研究应力腐蚀断裂和氢脆，检测马氏体相变，评价表面化学热处理渗层的脆性，以及监视焊后裂纹产生和扩展等等。
（7）超声波衍射时差法（TOFD）：TOFD技术于20世纪70年代由英国哈威尔的国家无损检测中心Silk博士首先提出，其原理源于silk博士对裂纹尖端衍射信号的研究。
2 液体渗透检验
上述分析了国内外常用的检验方法有七种。但液体渗透检验在实际工作中采用的很多。下面以AP1000蒸汽发生器管板加工过程中的检验为例，分析其操作步骤及操作方法。
管板堆焊层模拟试验件的检验时机为：堆焊层焊接完成并机加工以后及堆焊层热处理后进行。检验区域为：管板堆焊层模拟试验件的堆焊层表面的整个表面。经机加工或打磨后的表面粗糙度不应大于6.3μm。
管子管板焊缝的检验区域为焊缝及邻近边缘（其宽度等于理论焊缝厚度值并不超过5mm）的区域。
检测过程中，被检焊缝、零件及渗透用品的温度应保持在10～50℃之间。在达不到此温度的场合（在室外或现场检验时），应使用适当的加热方法使工件表面温度升高至10℃以上，但被检表面温度不得超过50℃。
使用着色渗透剂时，可采用人工或自然照明，受检表面可见光照度不得小于500lx。渗透检验方法为溶剂去除型着色渗透检测方法（IIC-d）。
液体渗透检验材料指检验过程中所用的渗透剂、清洗剂和显像剂。液体渗透检验试剂应配套使用，不能混用，并在有效期内使用。用于管板堆焊模拟试验件的渗透材料，使用下表1的材料。
表1 渗透材料
液体渗透检验试剂（渗透剂、显像剂、清洗剂等）必须符合A***E的规定。渗透检测剂必须有良好的检测性能，对工件无腐蚀，对人体基本无毒害作用。对用于镍基合金、奥氏体不锈钢材料，渗透检验材料中的有害元素氟、氯、硫的含量应不得超过下列规定：
氟+氯――200ppm；硫――200ppm。
渗透剂应在10～50℃的暗处贮存，并避免阳光照射。
2.1 检验步骤
（1）首先进行预清洗，即保证待检查的工件表面及相邻至少25mm的区域内清洁、干燥，并应无锈蚀、氧化皮、焊剂、飞溅物、油脂、油漆、油、纤维、灰尘和其它能干扰渗透或堵塞缺陷表面开口的外来物质。
***1 液体渗透对比试块
（上接第119页）（2）在预清洗后干燥在预清洗之后，采用然蒸发或吹以热风或冷风使被检表面的干燥。保持，干燥时间至少5分钟，以确保在施加渗透剂之前清洗用的溶剂已经蒸发。
（3） 施加渗透剂：在整个渗透期间渗透剂和零件表面温度应保持在10℃～38℃。采用喷涂、刷涂的方法，使待检表面被渗透剂全部润湿覆盖。温度在从10℃到38℃之内，表面应保持润湿状态不小于10分钟。如果必要，在持续时间内可以重复施加渗透剂。如***1所示为液体渗透对比前后对比示意***。
2.2 检验方法
（1）去除多余渗透剂：清洁检测表面的多余渗透剂，用干燥的布或吸湿纸揩去多余的渗透剂，反复擦除，直至绝大部分渗透剂被去除，再用清洗剂润湿的布或吸湿纸轻擦，以除去残留的渗透剂。为了尽量避免将不连续中的渗透剂清洗掉，要注意防止使用过多的清洗剂。在施加渗透剂以后到显像剂之前，禁止用清洗剂冲洗表面。
（2）去除多余渗透剂后干燥：对溶剂去除技术而言，可以采用自然蒸发，吸干，抹干，或者吹干表面。
（3）显像为了使显像剂在焊缝表面能够均匀覆盖，显像剂必须摇拌后喷涂到工件表面，显像剂应薄而均匀，应通过正常蒸发干燥。湿显像剂涂层一干，最终解释时间即开始。显像时间至少7分钟。
（4）后清洗。如果残余的渗透剂可与其它成份相结合产生腐蚀， 且残余渗透剂和显像剂可能影响加工或使用， 则需要进行检查后的清洗， 可采用适当的清洗方法如简单水洗，溶剂浸渍，机械清洗，蒸汽除油等。
（5）修补后检测。不可接收的相关显示应该去除，并应使用本规程重新检测确认其是可以接受的。
3 结语
在对AP1000蒸汽发生器加工的管板采用此种液体渗透检验检测方法，能较好的进行加工质量的检查，有效地保证了蒸汽发生器管板的加工质量，确保了在运行时的安全性能，同时，也解决了采用其他检测方法无法进行可靠检测的问题。
【参考文献】
[1]魏免，等.无损检测技术应用研究[J].大观周刊，2011.
[2]汪力.航空发动机涡轮叶表粘贴残留物红外检测[D].南昌航空大学，2012.
[3]韩明.大型零件超声检测运动控制系统的研究[D].天津工业大学，2011.
检验试剂篇10
【关键词】 长链脂肪***注射液；细菌内毒素；鲎试验；干扰试验
细菌内毒素检查是药品一个非常重要的安全指标，输液导致热原超标是输液反应的主要原因[1]，近年来，世界各国越来越多地以细菌内毒素检查法代替家兔热原法检查药品和生物制品的致热物质越来越普遍。长链脂肪***注射液临床常用口服或肠内营养摄取不能、不足或禁食的患者，进行肠外营养补充脂肪。《中国药典》2005年版尚未收载该品种。为此，特对国产长链脂肪***注射液进行了细菌内毒素的检查。
1药品与试剂
长链脂肪***注射液，湖南中南科伦药业有限公司，250ml：5g脂肪与3g磷脂，批号：e080401e080402e080403，细菌内毒素标准品（中国药品生物制品检定所，批号：150601200860，每支160eu）；细菌内毒素检查用水（湛江博康海洋生物制品有限公司，批号：080529）；鲎试剂（湛江安度斯生物制品有限公司，λ=0.25eu·ml-1,批号：0805081），鲎试剂（湛江博康海洋生物有限公司，λ=0.25eu·ml-1，批号：0801220）
2 方法与结果
2.1 鲎试剂灵敏度（λ）的复核照《中国药典》[2]附录规定的方法，对实验所用的鲎试剂（tal）进行灵敏度复核。133229.Com结果鲎试剂的实测灵敏度均在0.5λ～2.0λ之间，符合规定。正式实验时取λ作为鲎试剂的灵敏度。
2.2 样品细菌内毒素限值（l）的确定参照《中国药典》确定样品的细菌内毒素限值（l），l=k·m-1，k为人用每千克体重每小时最大可接受的细菌内毒素剂量，非放射性药品静脉途径给药时k值为5eu·kg·h-1，m为人用每千克体重每小时给药最大剂量。长链脂肪***注射液成人最大剂量为0.75ml·kg-1·h-1。综合生产、临床用药和检验的实际情况，将长链脂肪***注射液的l值定为0.5eu·ml-1。表1 样品的干扰预试验表2 caadi的干扰试验
2.3 样品的干扰试验用λ=0.25eu·ml-1鲎试剂进行干扰试验时。取2.1项下鲎试剂，分别对1批已检测细菌内毒素不超标的样品进行原液、2倍和4倍稀释（批号：e080401），进行细菌内毒素干扰试验。样品在表1所述3种浓度下，对细菌内毒素检查均无干扰，故正式实验将样品稀释至2倍和4倍，并取2个厂家灵敏度为0.25 eu·ml-1的鲎试剂，参照有关文献[3]按灵敏度复核方法对样品稀释至2倍和4倍进行干扰实验，并计算以样品稀释液配制的细菌内毒素溶液反应终点浓度的几何均值（et)及细菌内毒素检查用水配制的内毒素溶液反应终点浓度的几何均值（es）。
表2可以看出，用长链脂肪***注射液的2倍和4倍稀释液进行干扰试验时，其et与相应的es均在0.5～2.0之间，且es在0.5λ～2.0λ之间，表明此时样品2倍和4倍稀释液对细菌内毒素检查均无干扰。
2.4 样品中细菌内毒素的常规检查取上述3批长链脂肪***注射液稀释2倍，以λ=0.25 eu·ml-1的鲎试剂，按常规凝胶法进行细菌内毒素检查（表3）。结果上述3批长链脂肪***注射液2倍稀释液中的细菌内毒素含量均小于0.25 eu·ml-1，且对鲎试验检查无干扰作用。表3 样品中细菌内毒素的常规检查
3 讨论
凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来检测[4]，要求在适宜的温度、ph值及无干扰作用时鲎试剂能与微量的细菌内毒素反应形成凝胶，通过肉眼观察结果。在建立新药的细菌内毒素检查法时，首先要确定其细菌内毒素限值，还要求至少取3批样品，并应用2个厂家的鲎试剂进行细菌内毒素的干扰试验，确认样品在某一浓度下不会干扰细菌内毒素检查[2]，本品根据长链脂肪***注射液最大临床的规定剂量，确定其细菌内毒素限值为内毒素应小于0.5eu·ml-1，并应用2个厂家鲎试剂对3批长链脂肪注射液样品进行了细菌内毒素检查的干扰试验，结果当样品稀释2倍时，对鲎试验检查无干扰作用。从而证实可以建立该品种的细菌内毒素检查法，其细菌内毒素限值应小于0.5eu·ml-1。
【参考文献】
1 孙佩芳,王春江,王建民,等.5年输液反应送检结果分析[j]中国医院药学杂志,2002,22(2):122-124.
2 中华人民共和国国家药典委员会. 中国药典[s]. 二部, 北京: 化学工业出版社, 2005, 附录8687.