一、实验材料分析
肺炎双球菌是一种细菌,有两种类型:一种是R型细菌,无多糖类的荚膜,是无毒性的;另一种是S型细菌,具有多糖类的荚膜,是有毒性的。R型实际上是S型肺炎双球菌的突变类型,二者属于同一个物种。
荚膜是细菌细胞壁绕一层较厚的黏性、胶冻样物质。其化学成分随细菌种类不同而有差异,多数细菌的荚膜成分为多糖,如肺炎双球菌。荚膜的形成受遗传物质(基因)控制。荚膜与细菌的致病性有关,同时荚膜还能储留水分能抗干燥,对保护细菌有作用。荚膜本身无毒性,但在机体内保护细菌抵抗吞噬细胞的吞噬及消化,并能抑制体内杀菌物质(如溶菌酶)的杀菌作用,使细菌易在体内大量繁殖致病。细菌若失去荚膜,致病力也随之减弱或消失。相比较而言,S型肺炎双球菌更容易在小鼠体内存活并繁殖,从而使小鼠染病死亡。
二、实验注意事项
特别提醒的是:(1)加热杀死的S型细菌,其蛋白质变性失活,DNA在加热过程中双螺旋解开,氢键被打断,但缓慢冷却时,其结构可恢复;(2)转化的实质是S型细菌的DN段整合到了R型细菌的DNA中,即实现了基因重组;(3)转化后形成的S型细菌可以遗传下去,说明S型细菌的DNA是遗传物质。
当然,要解答好肺炎双球菌的转化实验题型,就必须掌握肺炎双球菌的转化实验的知识点。肺炎双球菌的转化实验要点见下表:
例肺炎双球菌有光滑型(S型)和粗糙型(R型)两种类型。其中S型细菌外面有多糖类的荚膜,有致病性,其菌落是光滑的;R型细菌外面没有荚膜,无致病性,其菌落是粗糙的。请分析下列实验并回答问题。
(1)S型肺炎双球菌有不同的亚型,其主要区别在于构成荚膜的多糖存在差异。格里菲思将S-Ⅲ型菌在特殊条件下进行体外培养,从中分离出R-Ⅱ型菌。由此判断,R-Ⅱ型菌的出现是______________的结果。
(2)格里菲思又利用S型菌和R型菌做了如下实验:
对上述现象的正确解释是R-Ⅱ型菌从_______中获得了_________,导致细菌转化,从而恢复了形成荚膜的能力。
(3)在格里菲思所做实验基础上,艾弗里设计了肺炎双球菌的体外转化实验(如下***所示)。在艾弗里设计的实验中,最关键的思路是,首先从________然后____________,观察______________________。
(4)艾弗里所做的实验中,设置1~5组实验的目的是_____________,实验结果说明________。5、6组实验结果说明_______________。
(5)在格里菲思所做的实验中,灭活S-Ⅲ型菌的加热温度是60~65℃之间。在此温度条件下,DNA失活是因为DNA分子发生________________;但当温度恢复至适宜温度后,DNA分子又会___________________,保持其遗传特性。
解题关键清楚肺炎双球菌转化实验的设计思路,对比体内转化实验和体外转化实验,落实设计思路的区别。
答案
(1)基因突变
(2)S-Ⅲ型菌某种物质(转化因子)
(3)S-Ⅲ型菌中提取,分离(和鉴定)出各种成分分别与R-Ⅱ型菌混合培养其后代是否有S-Ⅲ型菌(菌落)出现
(4)相互对照S-Ⅲ型菌的DNA是使R型菌发生转化的物质DNA结构必须保持完整才能行使遗传功能(或DNA结构被破坏失去遗传功能)
(5)解旋(或变性)复性(恢复双螺旋结构)
巩固练习
1. “肺炎双球菌的转化实验”证明了DNA是遗传物质,而蛋白质不是遗传物质。得出这一结论的关键是()
A.用S型活细菌和加热杀死后的R型细菌分别对小白鼠进行注射,并形成对照
B.用杀死的S型细菌与无毒的R型细菌混合后注射到小白鼠体内,测定小白鼠体液中抗体的含量
C.将S型细菌的各种物质分离并分别加入到各培养基中,培养R型细菌,观察是否发生变化
D.从死亡小白鼠体内分离获得了S型细菌
2. 某研究人员模拟肺炎双球菌的转化实验,进行了以下4个实验:
①S型细菌的DNA+DNA酶加入R型细菌注射入小鼠
②R型细菌的DNA+DNA酶加入S型细菌注射入小鼠
③R型细菌+DNA酶高温加热后冷却加入S型细菌的DNA注射入小鼠
④S型细菌+DNA酶高温加热后冷却加入R型细菌的DNA注射入小鼠
以上4个实验中小鼠存活的情况依次是()
A.存活,存活,存活,死亡
B.存活,死亡,存活,死亡
C.死亡,死亡,存活,存活
D.存活,死亡,存活,存活
3. S型细菌具有多糖类荚膜,R型细菌则不具有。下列叙述错误的是()
A.培养R型活细菌时加S型细菌的多糖类物质,能产生一些具荚膜的细菌
B.培养R型活细菌时加S型细菌的DNA的完全水解产物,不能产生具荚膜的细菌
C.培养R型活细菌时加S型细菌的DNA,能产生具荚膜的细菌
D.培养R型活细菌时加S型细菌的蛋白质,不能产生具荚膜的细菌
4. 如下***为肺炎双球菌转化实验的一部分***解,请据***回答:
(1)该实验是____________所做的肺炎双球菌转化的实验***解。
(2)该实验是在________实验的基础上进行的,其目的是证明___________的化学成分。
(3)在对R型细菌进行培养之前,必须首先进行的工作是_______________ 。
(4)依据上面***解的实验,可以作出_________________的假设。
(5)为验证上面的假设,他们设计了下面的实验:
在该实验中加入DNA酶,他们观察到的实验现象是___________________。
(6)通过上面两步实验,仍然不能说明______________,为此他们设计了下面的实验:
他们观察到的实验现象是____________,该实验能够说明___________________。
答案
1. C 2. D 3. A
4. (1)艾弗里及其同事(2)格里菲思肺炎双球菌转化“转化因子”(3)分离并提纯S型细菌的DNA、蛋白质、多糖等物质(4)DNA是遗传物质(5)培养基中只长R型细菌(6)蛋白质、多糖等不是遗传物质培养基中只长R型细菌蛋白质、多糖不是遗传物质
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