学文网摘要：近年来，作为扩大药源的一个方面，对天然药物的提取方法已有很多人研究过，为了扩大贵细药材人参的药源，特以水为提取溶剂进行工艺优化。以人参茎叶为材料，以水为提取溶剂，以人参皂苷Rg1为对照品，利用大孔树脂进行富集纯化，采用传统显色方法香草醛一高氯酸比色法进行含量测定。通过正交实验进行工艺优化，综合评价加水量，煎煮时间，煎煮次数三因素对人参总皂苷获得率的影响，结果表明煎煮时间为主要影响因素，加水量、煎煮次数为次要因素，最佳工艺为B3C3A1，即煎煮时间为90min，加水量为12倍，煎煮4次。人参皂苷Rgl在30.00～100.00μg范围内呈良好的线性关系，相关系数r=0.9989。
关键词：人参茎叶总皂苷；提取工艺；正交实验
中***分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1007－2349(2008)03－0048－02
人参叶为五加科植物人参(Panaxgensent C.A.Mey)的干燥叶，人参的主要成分有人参皂苷、挥发油、有机酸及酯、含氮化合物、维生素、酶类、糖类及微量元素等，其中人参皂苷是人参的主要有效成分。近几十年，作为扩大药源的一个方面，人们分别对人参茎叶、人参花蕾、人参果实等部位进行了研究，结果发现除了人参根之外，人参植株其它部位也含有人参总皂苷，而人参茎叶中含量更高。人参茎叶具有补气，益肺，解暑，生津的功能，用于气虚咳嗽，暑热烦躁，津伤口渴，头目不清，四肢倦乏等症。从人参茎叶中提取人参总皂苷，作为提取物应用是扩大人参药源的一种途径。目前提取人参皂苷的方法有很多种，多倾向于使用不同浓度的乙醇作为溶剂，但乙醇对叶绿素的溶解性较大，不易除去，影响皂苷质量，故本文采用水为溶剂，叶绿素不易溶于水，可减少后继工作的负担。本文以人参茎叶为原料，以水为溶剂，通过正交实验进行提取工艺优化，同时利用大孔树脂进行富集纯化，以获得高收率，高纯度的人参茎叶总皂苷。
1 材料
1.1 实验药品及试剂 人参茎叶(购自哈尔滨三棵树中药材批发市场，产于吉林长白山地区)，人参皂苷Rg1(中国药品生物制品检定所)，试剂均为分析纯。
1.2 实验器材 722型光栅分光光度计(上海第三分析仪器厂)，AL204型电子天平(上海人和科学仪器有限公司)，AB8型大孔树脂(天津南开大学化工厂)。
2 方法
2.1 标准曲线的绘制 准确称量人参皂苷对照品Rgl2.00mg，用甲醇定容至10.00mL，配制浓度为1.20mg／mL，分别取0.25，0.30，0.35，0.40，0.45，0.50mL，分别置于6支10ml。具塞试管中，水浴蒸干，往每支试管中加入5％香草醛一冰醋酸溶液0.2mL，高氯酸0.8mL(二者体积比例1:4，临用新配)，60℃水浴保温15min，取出后水浴冷却，加冰醋酸5.0mL，摇匀。随行试剂作空白，于550nm测定吸收值，以皂苷含量为横坐标，以吸收值为纵坐标，获得标准曲线为y=3.7171x-0.052，相关系数r=0.9989。结果表明人参皂苷Rg,在30.00～100.00μg范围内呈良好的线性关系。
2.2 人参茎叶总皂苷提取条件的优化 取100g人参茎叶剪段，根据加水量(A)，煎煮时间(B)，煎煮次数(C)制定L9(34)正交表，见表1。
2.3 人参总皂苷的含量测定
2.3.1 供试品溶液的制备 准确称量人参茎叶提取物0.05g，加入10mL蒸馏水溶解，水液通过AB8型大孔树脂柱，大孔树脂干重10g，以水50mＬ洗脱，弃去水洗液，再用20％乙醇50mL洗脱，弃去20％乙醇洗脱液，继以80％乙醇80mＬ洗脱，收集洗脱液80mI.，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容转移至10mL容量瓶中，定容，摇匀。精密量取1mL于10mL容量瓶中，加入甲醇定容，摇匀，即制得总皂苷含量测定所需的供试品溶液。
2.3.2 含量测定 按“标准曲线绘制”方法操作，获得总皂苷吸光度，根据其吸光度得到总皂苷含量，计算公式为：
4 结论
经直观分析与方差分析，各因素对人参总皂苷提取率的影响各不相同，其大小顺序为B＞C＞A，即煎煮时间为主要影响因素，加水量及煎煮次数为次要因素，从统计表中可以看出133 C3A，为最佳工艺，即加水量为原药材的12倍，每次煎煮90min，共煎煮4次，获得皂苷率超过6％，较为理想。由于溶剂系统为水，由于人参茎叶中含有大量的叶绿素。为人参茎叶中非有效成分。且较难去除，因而人参茎叶总皂苷的提取方法亦较难确定。本文以水为溶剂，而叶绿素难溶于水，因而在提取的过程中不易进入提取溶液中，因而降低了后续工作中的难度，减少不必要的麻烦，简化了工艺。本工艺获得皂苷率相对较高，所需成本较低，环境污染小，故更适合于工业化生产。
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