摘要:目的:对传统中药厚朴中有效成分厚朴酚的提取方法进行研究。 方法: 通过系统比较厚朴的水提、醇提、碱提、超声提取等工艺路线,优化工艺条件,以确定最优提取方法。结果:超声提取法具有较高的提取效率,且操作简便,条件温和,有利于厚朴中多种成分的同时提取。结论:超声提取法可有效应用于厚朴中有效成分的提取,有效节约提取成本,值得推广。
厚朴为木兰科植物厚朴Magnolia officinalis Rehd. Et Wils. 或凹叶厚朴Magnolia officinalis Rehd. Et Wils. Var. biloba rehd. Et wils. 的干燥干皮、根皮和枝皮[1,2],具有下气除满、燥湿化痰的功,临床上常用于湿滞伤中,脘痞吐泻诸症[3,4]。现代药学研究表明,厚朴为芳香化湿类药物,主要含有厚朴酚、和厚朴酚、挥发油类及生物碱类成分,其中厚朴酚是其主要药效成分,常被用于作为厚朴质量控制的重要指标[5,6]。为更好的发挥厚朴的药用价值,以厚朴酚的含量为评价指标,本文系统比较了水提、醇提、碱提及超声提取的效果,优化工艺路线,有效提高提取效率,以期通过选择高效、便捷的提取方法,减少应用成本。
1. 材料与仪器
1.1 材料
厚朴购自当地药房并经鉴定,确定为木兰科植物厚朴的干燥干皮;厚朴酚对照品购自中国药品生物制品检验所,色谱级甲醇购自默克公司,其余化学试剂均为分析级,由广东化学试剂厂提供。
1.2 仪器
高效液相色谱仪(岛津LC-10AVP);紫外检测器(岛津SPD-10AVP)。
2 方法与结果
2.1 厚朴中厚朴酚提取方法
水提工艺:准确称量厚朴药材50g,加水500mL,加热煎煮1h后过滤,所得滤液定容至500mL,备用。
醇提工艺:准确称量厚朴药材50g,以90%的乙醇溶液100mL回流提取5次,每次时长1h,过滤并合并滤液,最终定容至500mL,备用。
碱提工艺:准确称量厚朴药材50g,以0.5%的NaOH溶液95℃水浴温浸2次,每次各1h,第一次NaOH溶液300mL,第二次NaOH溶液200mL,合并溶液并以6mol/L的盐酸溶液调pH值至7左右,定容至500mL,备用。
超声提取工艺:厚朴药材粉碎至粗粉,过40目筛后,准确称取5g,加入50mL蒸馏水作为提取溶剂,超声温度设为35℃,超升功率为500kw,超声提取1h,过滤液低压蒸干后,50mL甲醇充分溶解定容后,备用。
2.2 厚朴酚含量测定色谱条件
Agilent SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm) 色谱柱,温度:35℃,流动相:甲醇-水(85:15),以0.8mL/min等度洗脱10min,检测波长:294nm。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取厚朴酚对照品10mg,加甲醇定容至50mL,摇匀,得对照品溶液,进行 标准曲线绘制,得回归方程Y=2.758×105X+38.67。结果表明,厚朴酚在10ng-10μg之间具有良好的线性关系。
2.4 厚朴酚含量测定方法
精密吸取提取液1mL,加入至50mL容量瓶,甲醇稀释定容至刻度,过0.45μm微孔滤膜。按2.2项下色谱条件测定各提取液中厚朴酚含量。
2.5 结果
各提取方法厚朴酚含量测定结果如表1所示。结果显示,4种方法均获得较好的提取效果,其中以碱提法提取率最高,超声提取法次之。
表1 厚朴药材不同提取工艺厚朴酚含量测定结果
3 讨论
厚朴药材中除含有厚朴酚、和厚朴酚、挥发油及生物碱类有效成分外,还含有大量树脂类成分[5,6]。此外,厚朴内含有的有效成分具有脂溶性、挥发性和氧化性等多种理化性质,在提取、生产、干燥等工艺中极易发生挥发、氧化等物理化学变化。因此,选择合适的提取工艺是确保厚朴内药效成分被有效提出的关键。
目前,主要有水提、醇提、碱提等技术运用于厚朴的有效成分的提取过程[7,8],此类依靠高温提取的方法均难以避免挥发油类成分的挥发,从而导致药材的提取率下降且携带较多的杂质。近年来,超声提取技术因为其简便、经济、高效的特点,被越来越多的应用于中药材有效成分的提取过程。本文从此角度出发,以厚朴酚的含量作为评价标准,初步比较了水提、醇提、碱提及超声提取的效果,实验结果表明,虽然超声提取法的厚朴酚的提取效率低于碱提法,但是明显优于水提法和醇提法,不仅有效解决了碱提法过程中含有过多杂质的缺点,同时由于超声提取法采取的是常温提取,避免了提取过程中由于温度过高导致挥发油类有效物质挥发或者结构破坏的问题,充分验证了超声提取方法可有效应用于厚朴中有效成分的提取,值得在生产工艺中进一步加以优化,以应用于更为广泛的领域,有效节约提取成本,增加药材的提取效率。
参考文献:
[1] 杨占南,孙一铭,罗世琼等.厚朴和凹叶厚朴的质量评价[J].广东农业科学,2012,39(15):108-111.
[2] 权婧婧,房艺丹,雷迎等.厚朴叶的开发利用研究进展[J].安徽农业科学,2011,39(33):20396-20397,20423.
[3] 吴经耀,陈素红,吕圭源等.厚朴归脾、胃、肺经及相关药理作用研究进展[J].亚太传统医药,2011,07(2):148-150.
[4] 张林,王洪.厚朴的现代药理研究进展[J].内蒙古中医药,2010,29(8):105-107.
[5] 任坚忍,余凡,张诗蓓等.厚朴活性成分研究进展[J].现代农业科技,2011,(21):127-128.
[6] 龚建明,林勇.厚朴的现代研究与进展[J].东南国防医药,2008,10(2):125-126.
[7] 张丹,颜学伟,王刚等.正交法优选厚朴叶中厚朴酚与和厚朴酚的提取工艺[J].安徽农业科学,2012,40(21):10810-10811,10836.
[8] 李锐,陈中兰,肖宏等.厚朴中厚朴酚及和厚朴酚提取工艺的优化研究[J].中国药业,2011,20(10):47-48.
转载请注明出处学文网 » 传统中药厚朴中有效成分厚朴酚提取方法研究