学文网摘要:[目的] 通过对肺结核患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分析,探讨其在肺结核患者中的临床意义。
[方法] 采用流式细胞技术多色荧光分析法,测定84例肺结核患者及29例健康体检者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平,观察肺结核患者与健康对照者之间、各型肺结核之间及结核杆菌阳性与阴性者之间的差别。
[结果] 肺结核患者CD4+CD25+所占比例为(10.81±2.65)%,与健康对照组差异有统计学意义(P
[结论] CD4+CD25+调节性T细胞可作为判断肺结核患者免***功能的指标,它对肺结核患者的免***状态、指导用药、疗效观察有一定的临床意义。
关键词: 肺结核; 调节性T淋巴细胞; CD4+CD25+T细胞 中***分类号:R 521 文献标志码: A
CD4+CD25+ regulatory T cell in peripheral blood of patients with pulmonary tuberculosis: Its detection and clinical significance
LIU Hong-mei (The Sixth People’s Hospital of Shaoxing, Zhejiang 312000 China)
Abstract:[Objective] To analyze CD4+CD25+ regulatory T cell (Treg) in the peripheralblood of patients with pulmonary tuberculosis and explore its clinical significance.
[Methods] A series of 84 pulmonary tuberculosis patients were detected by flow cytometry with multicolor fluorescence technology for CD4+CD25+ regulator T cell, with 29 healthy persons as control group.The differences were analyzed betweentypes of pulmonary tuberculosis, bacteriologically positive and negative, initial treatment and retreatment.
[Results] The percentage of CD4+CD25+ regulator T cell of pulmonary tuberculosis patients (10.81±2.65) wassignificantly higher than that of controls (P
[Conclusion] CD4+CD25+ regulator T cell can be used as indicator of the immune function in pulmonary tuberculosis patients.It is of clinical significance for theobservationofimmune status,medication andcurative effect on pulmonary tuberculosis patients.
Key words: Pulmonary tuberculosis; Regulatory T cell; CD4+CD25+T cell
结核是T淋巴细胞介导的细胞免***。调节性T细胞参与自身免***、肿瘤免***和其他传染性病原体的免***过程,这些细胞在结核杆菌引起的免***抑制中发挥作用。我们采用流式细胞仪检测了肺结核患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞),探讨肺结核患者CD4+CD25+Treg细胞介导的细胞免***与疾病发展的关系,为肺结核的免******提供相关依据。
1 材料与方法
1.1 对象
肺结核组为我院2007年11月至2008年6月住院的84例肺结核患者,均根据临床症状、体征、X线胸片、CT扫描、痰菌检查确诊,其中男性51例,女性33例,年龄28～78岁,Ⅲ型结核66例,Ⅳ型结核18例;对照组均为健康体检者,共29例,其中男性18例,女性11例,年龄20～67岁。
1.2 试剂和仪器
所用仪器为Beckman-Coulter Epics XL流式细胞仪,所用试剂为CD4-FITC,CD25-PE,IgG-FITC,IgG-PE,均购自美国Beckman-Coulter公司。
1.3 方法
取1 mL静脉血,以EDTA抗凝,混匀后,各取100 μL全血于2支测定管中,第1管加入IgG-FITC、 IgG-PE;第2管加入CD4-FITC、 CD25-PE;每测定管每种单克隆抗体量均为20 μL。试剂和抗凝血混匀后,在室温、避光条件下作用20 min,利用Beckman-Coulter的快速标本制备仪溶解红细胞,在流式细胞仪上测定。测定CD4+CD25+时,利用侧向散射光SS和前向散射光FS选取淋巴细胞群(设门),以IgG1-FITC/IgG1-PE为同型对照,测定CD4+CD25+双阳性淋巴细胞的百分比。
1.4 统计学处理
应用SPSS 10.0对检测结果进行统计学分析,计量资料以均数±标准差(x-±s)表示,各组间差异比较用t检验,设P
2 结果
2.1 肺结核组与对照组外周血CD4+CD25+Treg细胞水平比较
肺结核组外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞总数的(10.81±2.65)%, 高于对照组的(6.52±2.06)%,两者差异有统计学意义(t=2.56,P
2.2 不同临床分型肺结核患者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平比较
Ⅳ型结核组患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞总数的(10.10±2.32)%,高于Ⅲ型结核组患者的(9.30±3.11)%,两者差异有统计学意义(t=2.11,P
2.3 痰菌阳性与阴性肺结核患者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平比较
40例痰菌阳性的肺结核患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞总数的(12.30±2.56)%,44例痰菌阴性的肺结核患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞总数的(8.83±3.11)%,两者差异有统计学意义(t=3.22,P
2.4 初治与复治肺结核患者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平比较
59例初治肺结核患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞总数的(10.97±2.31)%,25例复治肺结核患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞总数的(11.26±3.09)%,两者差异无统计学意义(t=1.77, P>0.05)。
3 讨论
CD4+CD25+Treg细胞是近年来发现的一种新型免***调节细胞,它由胸腺产生,具有免***抑制性,它的免***性表现在经TCR介导的信号刺激活化以后能够抑制CD4和CD8淋巴细胞的活化和增殖以及细胞因子的分泌。结核杆菌入侵机体后,在被感染的宿主体细胞内寄居、增殖,所以机体对肺结核的免***是T淋巴细胞介导的细胞免***。肺结核的发生、发展和预后不仅与结核杆菌感染的数量及其毒力有关,而且与宿主的细胞免***功能有着密切的关系。近年来,国内外在一些慢性感染性疾病中关于CD4+CD25+Treg细胞的研究报道较多,但对肺结核的临床意义研究甚少。
本文通过对84例肺结核患者和29例健康体检者外周血中CD4+CD25+Treg细胞数量的检测,发现肺结核患者CD4+CD25+Treg细胞显著高于对照组,与文献报道一致,提示Treg细胞在对结核菌免***反应方面扮演着重要的免***调节角色,肺结核患者的免***功能低下与外周血CD4+CD25+Treg细胞比例增加有关。进一步观察发现,Ⅳ型结核病患者的CD4+CD25+Treg细胞高于Ⅲ型结核病患者,提示肺结核患者调节性T细胞介导的免***反应与结核病分型有关。痰检阳性患者CD4+CD25+Treg细胞数值明显高于痰检阴性者,这是由于在活动性肺结核患者中,一方面由于CD4+CD25+Treg细胞通过与其他细胞直接接触,分泌细胞因子(IL-10、TGF-β、IL-2、IL-6)发挥对CD4+和CD8+T细胞增殖反应及杀伤功能的抑制作用,导致其溶解靶细胞和细胞毒作用减弱;另一方面在肺结核病中,CD4+CD25+Treg细胞抑制了单核细胞产生γ干扰素,这一现象已被抑制实验所证实。初治和复治肺结核患者的CD4+CD25+Treg细胞在总CD4+中所占的比例差异无统计学意义。CD4+CD25+T淋巴细胞的特征是免***低反应性和免***抑制功能,CD4+CD25+Treg细胞升高可能与肺结核慢性发展病程相关,是结核病复发的原因,机体免***状态的高低是直接影响肺结核的发生、病情轻重、***效果好坏的重要原因,因此,它对肺结核患者的免***状态、指导用药、疗效观察有一定的指导价值,CD4+CD25+Treg细胞可作为判断肺结核患者免***功能的指标。
4 参考文献
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(收稿日期:2009-10-21)
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