【摘要】目的:探讨PPAR-γ配体在肺癌中的表达及在肺癌细胞凋亡中的作用。方法:采用细胞培养法对80例肺癌患者PPAR-γ的表达进行检测,并采用RT-PCR和Westernblot检测肺癌细胞株中PPAR-γ的表达。采用TUNEL法检测凋亡。结果:PPAR-γ在肺癌、肺良性病变等组织中均有表达,并且在肺癌组织中光度值最高为;其次为肺部良性病变组织为0.1201±0.0308;正常肺部组织最低为0.1185±0.0296。PPAR-γ在在不同病理类型、肺癌患者分歧、细胞分化程度等总表达差异显著(P
【关键词】PPAR-γ配体;肺癌;表达;分化、增殖;凋亡;作用
肺癌是临床上发病率较高的疾病,这种疾病机制复杂,患者发病时表现为:咳嗽、咳血等,给患者带来很大痛苦。目前,对于肺癌医学界主要以手术***为主,但是患者***效果不好,***后不良反应较多。因此,探讨积极有效的方法***显得至关重要。过氧化物酶体增生物激活受体-γ是近年来临床上研究较多的一种转录因子,它在患者体内脂代谢和糖代谢中发挥重要作用。本实验通过检测PPAR-γ在肺癌和非肺癌组织中的表达,探讨PPAR-γ表达与肺癌临床病理特征的关系,分析报告如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
本次参加实验患者均为我院接受手术***的肺癌患者,患者手术前均得到确诊。患者中,男58例,女36例,年龄在32-76岁,平均年龄为56±1.4岁。患者中24例肺鳞癌,20例肺腺癌,18例大细胞肺癌,12例小细胞肺癌,15例肺部良性疾病。研究中,患者对其***方案等均具有完全知情权,实验均通过我院伦理委员会批准,患者年龄、病情等差异不显著(P>0.05)。
1.2方法
本次研究中主要采用细胞培养的方法,将PPAR-γ配体加入到生长有肺癌细胞的培养液中,通过细胞的形态学、生物化学和分子生物学等对癌细胞死亡情况进行检测,具体如下:(1)肺癌细胞株的培养。肺腺癌细胞株LCPC3在含10%FBS的RPML1640培养基中培养[1]。(2)肺癌生长曲线和MTT的测定。培养的肺癌细胞经用不同剂量PPAR-γ配体刺激后在不同时段采用流式细胞仪测定。(3)PPAR-γ的测定。培养的肺癌细胞经用不同剂量PPAR-γ配体刺激后在不同时段应用WesternBlot和RT-PCR检测PPAR-γ的水平。(4)COX-1和COX-2的测定。培养的肺癌细胞经用不同剂量PPAR-γ配体刺激后在不同时段应用WesternBlot和RT-PCR检测COX-1和COX-2的水平[2]。(5)CDK2的测定。将实验中培养的细胞通过不同的剂量在配体刺激后不同时间段利用WesternBlot法进行CDK2水平的检测。(6)细胞凋亡的测定。培养的肺癌细胞经用不同剂量PPAR-γ配体刺激后在不同时段应用DNALadderkit和Tune检测细胞凋亡情况。
1.3统计学处理方法
研究中,对PPAR-γ相关数据进行统计,采用SPSS16软件分析,并进行 检验,实验结果采用(x±s)表示。
2.结果
PPAR-γ在不同肺部疾病中均有表达,在肺癌组织中光度值最高为0.1832±0.0407;其次为肺部良性病变组织为0.1201±0.0308;正常肺部组织最低为0.1185±0.0296。
PPAR-γ在在不同病理类型、肺癌患者分歧、细胞分化程度等总表达差异显著(P
3.讨论
肺癌是临床上常见的疾病,这种疾病机制复杂,在我国肺癌发病率更高,且随着人们生活方式的不断改变,其发病率出现上升趋势,患者发病后早期临床症状不显著,患者一旦确诊多数患者已是中晚期,错过最佳手术时机。因此,临床上探讨积极有效的***方法显得至关重要。
近年来随着医疗技术的飞速发展,PPAR-γ在临床上研究较多,并取得阶段性进展。根据相关研究结果显示:PPAR-γ和肿瘤的发生、发展、凋亡等关系密切。PPAR-γ在细胞分化中比较重要,它属于常见的调控因子。相关研究结果显示:多数PP、脂肪酸以及PPAR-γ配体等都具有重要作用,均能够有效的抵抗肿瘤,诱导细胞凋亡等。目前,临床上使用较多的PPAR-γ配体有前列腺素衍生物(15d-PGJ2)、曲格列酮(Troglitazone)等[3]。根据国外相关学者研究结果显示:PPAR-γ配体激活PPAR-γ后,在正常细胞中PPAR-γ含量较低,而在肿瘤细胞中则异常升高,能够加速癌细胞凋亡。根据本人在日本进行相关研究结果显示:将PPAR-γ配体加入到生长有肺癌细胞的培养液后,PPAR-γ水平异常升高,并且随着剂量和处理时间的不断延长,患者癌细胞明显受到抑制,能够加速癌细胞凋亡。但是,临床上对于其机制等并不完全知晓,需要进一步研究。
综上所述,肺癌属于临床上发病率较高的恶性肿瘤,患者一旦确诊均属于中后期,使得患者错过最佳手术***时机。对PPAR-γ配体抑制肺癌细胞凋亡等研究能够为***肺癌提供新的理论依据,从而开辟出一条新的、可行的***肺癌的方法,并研发新的一线***药物,如:紫杉醇类新药等。由此可以看出:加强PPAR-γ配体对肺癌细胞凋亡作用研究具有广泛的学术价值和实践意义。
参考文献:
[1] 杨中卫,王成国. PPAR-γ信号通路在呼吸道疾病中的作用[J]. 医学综述. 2009(19)
[2] 张素霞,官阳,杨木兰,刘冰,周泽斌,张春明. PPARγ激动剂对肝癌细胞HepG2增殖的影响及其机制探讨[J]. 华中科技大学学报(医学版). 2009(05)
[3] 陈永熙,王伟铭,周同,陈楠. PPAR-γ作用及其相关信号转导途径[J]. 细胞生物学杂志. 2006(03)
基金:浙江省医药卫生科学研究基金(2003A033)
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