学文网雪的作用篇1
雪的作用很广，但雪对人类有很大的好处。首先是有利于农作物的生长发育。因雪的导热本领很差，土壤表面盖上一层雪被，可以减少土壤热量的外传，阻挡雪面上寒气的侵入，所以，受雪保护的庄稼可安全越冬。积雪还能为农作物储蓄水分。此外，雪还能增强土壤肥力。据测定，每1升雪水里，约含氮化物7.5克。雪水渗入土壤，就等于施了一次氮肥。用雪水喂养家畜家禽、灌溉庄稼都可收到明显的效益。
雪对人有利也有害处，在三四月份的仲春季节，如突然因寒潮侵袭而下了大雪。就会造成冻寒。所以农谚说：“腊雪是宝，春雪不好。”
而且雪对人体健康有很多好处。《本草纲目》早有记载，雪水能解毒，治瘟***。民间有用雪水***火烫伤、冻伤的单方。
经常用雪水洗澡，不仅能增强皮肤与身体的抵抗力，减小疾病，而且能促进血液循环，增强体质。如果长期饮用洁净的雪水，可益寿延年。这是那些深山老林中长寿老人长寿的”秘诀”之一。
雪为什么有如此奇特的功能呢？因为雪水中所含的重水比普通水中重水的数量要少1／4。重水能严重地抑制生物的生命过程。有人作过试验，鱼类在含重水30－50％的水中很快就会死亡。雨雪形成最基本的条件是大气中要有“凝结核”存在，而大气中的尘埃、煤粒、矿物质等固体杂质则是最理想的凝结核。如果空气中水汽、温度等气象要素达到一定条件时，水汽就会在这些凝结核周围凝结成雪花。所以，雪花能大量清洗空气中的污染物质。故每当一次大雪过后空气就显得格外清新。
雪的作用篇2
雪花是一种美丽的结晶体，它在飘落过程中成团攀联在一起，就形成雪片。单个雪花的大小通常在0.05——4.6毫米之间。雪花很轻，单个重量只有0.2——0.5克。无论雪花怎样轻小，怎样奇妙万千，它的结晶体都是有规律的六角形，所以古人有“草木之花多五出，度雪花六出”的说法。雪花多么美丽而轻盈呀！我越来越喜欢雪花了，如果能够再次目睹大地白雪皑皑，绿树披银装，真是一件赏心悦目的趣事。
雪的作用很广，但雪对人类有很大的好处。首先是有利于农作物的生长发育。因雪的导热本领很差，土壤表面盖上一层雪被，可以减少土壤热量的外传，阻挡雪面上寒气的侵入，所以，受雪保护的庄稼可安全越冬。积雪还能为农作物储蓄水分。此外，雪还能增强土壤肥力。据测定，每1升雪水里，约含氮化物7.5克。雪水渗入土壤，就等于施了一次氮肥。用雪水喂养家畜家禽、灌溉庄稼都可收到明显的效益。雪水温度低，能冻死地表层越冬的害虫，也给农业生产带来好处。所以有一句农谚“冬天麦盖三层被，来年枕着馒头睡。”
一般到了冬季，人们经常生病。如果下一场大雪，是最好不过了。它可以杀灭病菌，防止疾病传染。很多地方都是用锅炉取暖，炭黑的污染使一些人患了呼吸道感染。下一场雪就会把这些脏空气吸收，起到净化空气的作用。
我国民间，人们爱用陶罐将干净雪贮藏，等到炎热的夏季时用它擦洗身子，祛除痱子和伤疤。如果心火上攻，眼红目赤，用干净的冬雪水洗眼，能清火明目。在寒冬，手脚冻麻木时用积雪搓洗，又能舒筋热血，让人体遍身舒适。“瑞雪兆丰年”是我国广为流传的农谚。在北方，一层厚厚而疏松的积雪，像给小麦盖了一床御寒的棉被。雪中所寒的氮素，易被农作物吸收利用。
雪对人有利也有害处，在三四月份的仲春季节，如突然因寒潮侵袭而下了大雪。就会造成冻寒。所以农谚说：“腊雪是宝，春雪不好。”
雪的作用篇3
雪花是一种美丽的结晶体，它在飘落过程中成团攀联在一起，就形成雪片。单个雪花的大小通常在0.05——4.6毫米之间。雪花很轻，单个重量只有0.2——0.5克。无论雪花怎样轻小，怎样奇妙万千，它的结晶体都是有规律的六角形，所以古人有“草木之花多五出，度雪花六出”的说法。雪花多么美丽而轻盈呀！我越来越喜欢雪花了，如果能够再次目睹大地白雪皑皑，绿树披银装，真是一件赏心悦目的趣事。
“瑞雪兆丰年”是我国广为流传的农谚。在北方，一层厚厚而疏松的积雪，像给小麦盖了一床御寒的棉被。雪中所寒的氮素，易被农作物吸收利用。雪水温度低，能冻死地表层越冬的害虫，也给农业生产带来好处。所以又有一句农谚“冬天麦盖三层被，来年枕着馒头睡。”
雪的作用很广，但雪对人类有很大的好处。首先是有利于农作物的生长发育。因雪的导热本领很差，土壤表面盖上一层雪被，可以减少土壤热量的外传，阻挡雪面上寒气的侵入，所以，受雪保护的庄稼可安全越冬。积雪还能为农作物储蓄水分。此外，雪还能增强土壤肥力。据测定，每1升雪水里，约含氮化物7.5克。雪水渗入土壤，就等于施了一次氮肥。用雪水喂养家畜家禽、灌溉庄稼都可收到明显的效益。
雪对人有利也有害处，在三四月份的仲春季节，如突然因寒潮侵袭而下了大雪。就会造成冻寒。所以农谚说：“腊雪是宝，春雪不好。”
朋友们，听了我的介绍，你是否对雪更加喜欢和了解了呢？
雪的作用篇4
关键词：雪松；化感作用；发芽率；生物量；高度
中***分类号：S791 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160230182
中国是悠久的传统农业大国，在千年的农业耕种和培育过程中总结植物“化感作用”对农业的危害，通过农业耕种经验的积累和传承，在农业活动中学会利用轮作、休田等方式来应对植物化感作用对植物的危害。而化感作用的本质是通过挥发、淋溶、根系分泌和残体腐解等过程向环境中释放化感物质，从而抑制周围1种植物或多种植物生长发育的现象。
1 材料与方法
1.1 实验材料
2013年6月中旬，在西安市铁一中校园内雪松植物体上采集雪松不同组织，树龄20多年，采集后用保鲜袋密封带回实验室备用。选取的小白菜、油麦菜，小青菜种子均购于正规农技站并置于 4 ℃冰箱保存备用。
采用水蒸气蒸馏法提取、收集挥发油（中华人民共和国卫生部药监委员会，2005），将新鲜阴干的雪松不同组织（针叶，茎-皮，根部），剪碎5mm左右的长度，称200 g于2000mL的蒸馏水中，振荡混合均匀，浸泡湿润10 h，100℃提取4 h，得到有特殊香味的淡黄绿色的油状物，即为雪松不同组织挥发油，将挥发油密封，置于-18℃保存待用。
1.2 实验设计
实验材料纸杯75个，蔬菜种子1500粒，5种处理包括雪松植株不同组织（根、茎-树皮、针叶）的浸提液挥发油及对照组水和雪松土壤。种子播种需要2种土壤：雪松土壤（0～5cm的表层土，积累大量雪松化感作用物质）；距离雪松10m外的无雪松化感作用的良好土壤应用于雪松（根、茎-树皮、针叶）的浸提液挥发油及对照组。
用40ml的不同浸提液挥发油浸泡3类蔬菜种子6h，依据于实验前发现种子浸泡于自来水12h后就开始发芽。每种蔬菜重复处理5次，每个重复有种子20粒（1个纸杯），对照组及根、茎-树皮、针叶的浸提液挥发油溶液浸泡过的种子播种于无化感作用的良好土壤且种植与雪松土壤的种子浸泡于清水，从而通过测定不同处理对大白菜、油麦菜、小油菜种子的发芽率、生物量鲜重、植株高度及生长发育过程中的死亡情况等指标。
2 结果与分析
2.1 雪松化感作用对3种种子发芽率和种苗死亡率的影响
通过种植前清水、雪松针叶浸提液、雪松根浸提液、雪松茎浸提液浸泡小白菜、油麦菜、小青菜种子6h，利用雪松不同组织结构浸提液对植物种子发芽率的干扰来模拟雪松化感作用对相邻植物的影响。通过分析模拟数据发现：所有处理下的3种植物发芽率在种植第7～9天（13～15日）基本达到顶峰；而雪松土壤处理下种子在达到顶峰之后迅速出现了植物幼苗死亡现象并于17日趋于平稳波动；3种植物种子发芽率从高到低依次为对照组、根、茎、叶、雪松土壤（***1-5）。
2.2 不同种子的植株高度对雪松化感作用的响应
通过对3种植物的高度数据分析和统计发现：小白菜、油麦菜及小青菜植株高度对雪松不同结构组织浸提液没有规律性响应，在结合对照组及雪松土壤植株高度进行分析后表明本实验中植物高度对雪松化感作用没有规律性响应（***6）。
2.3 雪松化感作用对3类种子生物量鲜重的调节
生物量是植物生态学实验中重要测定指标，其能够反应不同实验处理对植物的干扰作用。本实验对不同处理下的3种植物的鲜重进行分表明：雪松针叶浸提液对3种植物鲜重影响和长期针叶堆积下的雪松土壤结果相似，并结合对照组结果表明雪松土壤、雪松针叶浸提液、茎浸提液、雪松根浸提液对3种植物生物量的影响依次降低。
3 讨论与结论
3.1 雪松化感作用对相邻植物的干扰作用
通过对3种植物发芽率和死亡率的分析表明：雪松不同组织浸提液都能够在种子种植第7d时达到相应处理条件下的最大种子发芽率；3种幼苗高度数据表明植物生长高度对雪松不同组织浸提液没有规律性响应；3种植物种子发芽率在雪松不同组织浸提液的影响下，发芽率从大到小依次为对照组、根、茎、叶、雪松土壤；在发芽率达到最高值后，由于雪松下长期积累很厚的松针且松针中的化感物质在土壤中过剩积累导致雪松土壤处理下的幼苗出现大幅度死亡；而3种植物生物量鲜重数据表明雪松土壤、雪松针叶浸提液、茎-树皮浸提液、雪松根浸提液对生物量的影响是依次降低的，这一结果和种子发芽率的趋势相似，并进一步表明低浓度的化感物质可以促进植物生物量而高浓度的可以抑制植物生物量的积累。
3.2 实验展望
根据生物量鲜重对不同组织浸提液的响应做出假设：化感物质的浓度从高到低依次为针叶、茎和根，认为低浓度的化感物质对种子发芽率的影响微乎其微且可以促进生物量的提高，相反高浓度的化感物质可以抑制种子发芽率及生物量。在此基础上做出未来实验计划，以雪松针叶为研究对象，通过碾磨相同质量的针叶，分别浸泡于不同体积水分从而制作出一系列浓度梯度并结合多种植物进行相关假设的验证与探究。
参考文献
雪的作用篇5
【摘要】
目的考察雪胆胃肠丸对实验性胃溃疡的作用。方法采用小鼠无水乙醇致胃溃疡和大鼠乙酸致胃溃疡模型，考察雪胆胃肠丸对抗实验性胃溃疡的作用。采用小鼠醋酸扭体实验和小鼠耳廓肿胀实验考察其镇痛和抗炎作用。结果雪胆胃肠丸均能使小鼠无水乙醇所致胃溃疡的溃疡面积明显减小，能降低大鼠溃疡指数，可降低醋酸致小鼠扭体反应的次数，抑制巴豆油致小鼠耳廓肿胀。结论雪胆胃肠丸对实验性胃溃疡有明显的保护作用。
【关键词】 雪胆胃肠丸 胃溃疡 镇痛 抗炎
Abstract：ObjectiveTo study the effects of Xue Dan Wei Chang pill on experimental gastric ulcer.MethodsAcetic acid model in rats and absolute ethanol gavage model in mice were used to study the anti-gastric ulcer effect.The mouse stretching model caused by acetic acid and the auricle swelling caused by croton oil in mice were adopted to study the analgesia and antiinflammatory effects of Xue Dan Wei Chang pill.ResultsXue Dan Wei Chang pill could reduce the areas of gastric ulcer caused by absolute alcohol in mice and acetic acid in rats，inhibit the auricle swelling caused by croton oil in mice and the number of stretching induced by acetic acid in mice.ConclusionXue Dan Wei Chang pill has protective effects on the experimental gastric ulcer.
Key words：Xue Dan Wei Chang pill; Gastric ulcer; Analgesia; Antiinflammatory
雪胆胃肠丸是从苗族民间传统秘方中开发出来的中药复方，含有雪胆、吴茱萸、木香、白及、黄芪等十多味中药材。经临床研究表明，雪胆胃肠丸对胃炎、萎缩性胃炎、十二指肠溃疡等疾病有独特的疗效［1］。我们对雪胆胃肠丸的药理作用进行初步研究，考察其抗胃溃疡、镇痛和抗炎作用，为雪胆胃肠丸的临床应用提供实验数据。
1 材料
1.1 动物昆明种小鼠，雌雄各半，体质量18～22 g。实验动物使用许可证：SYXK(苏)2007-0035。实验动物领取后适应环境1 d，置于标准笼子里，室内日夜温度维持在(22±2)℃，随意进食饮水。
1.2 药品雪胆胃肠丸由昆明生达制药有限公司提供。西咪替丁和吲哚美辛由上海衡山药业有限公司提供；硫糖铝由南京白敬宇制药有限责任公司提供。
2 方法
2.1 对无水乙醇致小鼠胃溃疡的影响［2］将小鼠随机分组，每组10只，分别为空白对照组，雪胆胃肠丸各剂量组（1.089，2.178，4.356 g·kg-1），硫糖铝组（280 mg·kg-1）和西咪替丁组（400 mg·kg-1）。空白对照组灌胃给予蒸馏水 20 ml·kg-1，其他组分别按照上述剂量灌胃给药，给药量为20 ml·kg-1，连续5 d，第5天给药后，小鼠禁食24 h，自由饮水，第6天，每组均正常给药，给药30 min后，每组分别灌胃给予无水乙醇（0.2 ml/只），1 h后颈椎脱臼处死小鼠。以上各组小鼠剖腹，游离胃，沿胃大弯剪开，用生理盐水冲去内容物，置于10%中性福尔马林溶液10 min后，取出展平，各组光镜下观察胃黏膜的组织学变化，并按Guth标准计算溃疡指数和抑制率：按溃疡或糜烂面积大小给予计分：①每3个点状溃疡（黏膜缺损小于1 mm或者出血性糜烂小点，称点状溃疡）计1分。②条状出血：以游标卡尺测量溃疡的最大长径和垂直于最大长径的最大宽径，二者的乘积即为溃疡指数。宽为1 mm者每毫米长为1分；2 mm宽者每毫米长为2分；3 mm宽者每毫米长为3分。
溃疡抑制率（%）=（平均模型组溃疡指数-平均实验组溃疡指数）/平均模型组溃疡指数×100%
2.2 对乙酸致大鼠胃溃疡的影响SD大鼠30只，禁食12 h后，按Okabe法［3］改良进行造模。大鼠腹腔注射3%戊巴比妥钠麻醉后， 用酒精棉球消毒皮肤，打开腹腔， 在腺胃部前壁窦体交界处浆膜面贴上浸透冰醋酸的圆形滤纸(直径5 mm) 30 s ， 重复3次， 关腹缝合创口。术后常规喂养，第2天将动物随机分组，每组6只，分别为雪胆胃肠丸各剂量组（1.089，2.178，4.356 g·kg-1）。于分组当天开始给药，给药1次/d，连续5 d。末次给药后12 h后脱颈椎处死动物，剖腹取胃，沿胃大弯剪开，用生理盐水洗涤胃内容物，将胃固定于10％甲醛中，15 min后将胃平展于玻璃表面皿上，在放大镜下用电子数显卡尺精确量取溃疡面的长径和短径，并计算溃疡面积［4］。
2.3 对醋酸致小鼠扭体的镇痛作用动物分组和给药剂量同前，连续给药，第5天给药后1 h ， 每只小鼠腹腔注射0.8%醋酸0.2 ml， 观察注射后20 min内小鼠的扭体反应次数。
2.4 对巴豆油致小鼠耳廓肿胀的影响实验动物分组和给药同前，末次给药1 h后，每只小鼠分别用 100 μl 5%巴豆油涂于右耳廓两侧致炎。 4 h后处死动物， 剪下左右耳，用打孔器(内径为7 mm) 打下耳片， 电子天平称重， 以左右耳的质量差值(肿胀度) 为指标， 考察抗炎作用。
2.5 数据处理结果以±s表示，用SPSS软件包进行统计分析。采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，检验整体性差异，随后采用Tukey’s检验进行组间比较。
3 结果
3.1 对小鼠无水乙醇致胃溃疡的影响雪胆胃肠丸（2.178，4.356 g·kg-1）与空白对照组比较，溃疡指数明显降低，有显著差异（P
3.2 对大鼠乙酸型胃溃疡的影响与空白对照组比较，雪胆胃肠丸（2.178，4.356g/kg）可明显降低大鼠胃溃疡指数（P
3.3 对醋酸致小鼠扭体的镇痛作用与空白对照组比较，雪胆胃肠丸（4.356g/kg）能明显降低小鼠扭体次数，提示其有镇痛作用。结果见表3。表3 对醋酸致小鼠扭体的镇痛作用(略)
3.4 对巴豆油致小鼠耳廓肿胀的影响与空白对照组相比，雪胆胃肠丸（2.178，4.356 g/kg）能明显降低小鼠耳廓肿胀（P
4 讨论
本文采用了无水乙醇和乙酸致胃溃疡模型考察雪胆胃肠丸对实验性胃溃疡的保护作用，另外采用小鼠醋酸扭体法和巴豆油致小鼠耳廓肿胀模型分别考察雪胆胃肠丸的镇痛抗炎作用。实验结果提示雪胆胃肠丸具有抗胃溃疡、镇痛和抗炎作用。
无水乙醇所致胃溃疡是由于酒精直接损伤胃黏膜，引起胃壁血液循环障碍、组织坏死脱落导致溃疡形成;其自然愈合达60～300 d。实验结果显示，雪胆胃肠丸能够显著减少胃溃疡溃疡面积及出血面积，其效果与硫糖铝和西咪替丁相近。说明其可能具有改善胃壁血液循环，促进受损胃黏膜愈合的作用，对急性胃溃疡具有较好的预防作用。
大鼠醋酸型胃溃疡模型是一种慢性胃溃疡模型，用于观察药物对胃溃疡的***效果。实验结果显示雪胆胃肠丸对醋酸型胃溃疡疗效显著，能够明显促进溃疡面的愈合，减少胃穿孔的出现，并且减少了胃黏膜出血面积，其效果与雷尼替丁相近。提示雪胆胃肠丸能促进受损胃黏膜愈合的作用，对慢性胃溃疡具有较好的***效果。
总之，雪胆胃肠丸可能是通过对胃黏膜的保护，镇痛和抗炎等多种环节起到***胃溃疡的作用，但其作用机制还有待进一步研究。
参考文献
［1］黄俊学，伍 庆，洪 亮.高效液相色谱法测定雪胆胃肠丸中甘草酸含量［J］.贵州师范大学学报(自然科学版)， 2005， 23（1）:104.
［2］Harbison SP， Dempsey DT. Peptic ulcer disease［J］.Currentproblem in surgery，2005， 42(6): 346.
雪的作用篇6
网
【关键词】 积雪草酸; 线粒体; 电压依赖性阴离子通道; 肝癌细胞株
［Abstract］Objective: To investigate the proliferation inhibition of asiatic acid(AA) on the human hepatoma cell line(HepG2) cells, and to study its potential correlation with mitochondria.Methods： The effect of AA on proliferation of HepG2 was tested by MTT, morphology of tumor cells was observed under inverted microscope; the mitochondrial mass was described by the fluorescence intensity of MitoTracker probe, mitochondrial membrane potential was detected with fluorescent probe JC?1, intracellular reactive oxygen species(ROS) content was detected with DCFH?DA，intracellular ATP level was measured by ATP Assay Kit, and the expression of voltage?dependent anion channel(VDAC) on mitochondrial outer membrane was determined by RT?PCR and Western Blot. Results： AA inhibited the proliferation of tumor cell lines(HepG2) dose?dependently, and cells rounded and shrank after treated with 30 μmol/L AA for 24 h.Mitochondrial membrane potential depolarized, intracellular ATP level decreased and ROS content increased dose?dependently after treating with AA, and VDAC expression was up?regulated by 50 μmol/L AA. Conclusion： AA exerted anti?tumor effects, which was related with mitochondria mediated death, and VDAC was involved in the cell death pathway.
［Key words］asiatic acid; mitochondria; voltage?dependent anion channel（VDAC）; HepG2 cells
肝癌是我国常见恶性肿瘤之一，死亡率高。抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡，是抗肿瘤药物作用的共同机制。线粒体在细胞死亡调控中发挥重要的作用，已成为癌症化学疗法的靶点［1］，通过线粒体途径诱发肿瘤细胞凋亡，是目前抗肿瘤药研发的重要方向之一。
积雪草酸(asiatic acid, AA),又名亚细亚酸,是我国传统中药积雪草的五环三萜类组分之一。经研究证明, AA具有对抗CCl4和D?GalN诱导的肝损伤［2, 3］、减弱化疗药物抗肿瘤的不良反应［4］、对抗神经细胞的氧化损伤［5］等作用。另外,也发现AA具有抑制黑色素瘤细胞增殖［6］、诱导直肠癌细胞凋亡的作用［7］。本研究探讨了AA对肝癌细胞株HepG2增殖的抑制作用及其与线粒体之间的关系。
1 材料与方法
网
1.1 材 料
1.1.1 实验材料
HepG2(人肝癌细胞株)由南京大学徐力致老师惠赠。 AA（Sigma 公司产品，美国）；MEM培养基（Gibco 公司产品，美国）；0.25%胰蛋白酶（Amresco 公司产品，美国）；胎牛血清（杭州四季青生物工程公司产品）；MitoTracker Red FM（Invitrigen公司，美国）；JC?1（Molecular Probes 公司，美国）；MTT（Amresco 公司产品，美国）；鼠抗人β?肌动蛋白单克隆抗体（Abcam公司，美国）；鼠抗人VDAC抗体（Abcam公司，美国）；羊抗小鼠 IgG?HRP(horseradish peroxidase)（武汉博士德生物工程有限公司）；ECL 超级发光液（碧云天生物工程公司）；考马斯亮蓝蛋白定量试剂盒（南京建成生物工程研究所）；其余未特殊注明的试剂均为进口或国产分析纯。
1.1.2 主要仪器
Spectra Max 190酶标仪（Molecular device，美国）；Spectra MaxGemini荧光酶标仪（Molecular device，美国）；核酸蛋白分析仪（岛津公司，日本）；Bio?Rad电泳仪（Bio?Rad，美国）；TE2000荧光显微镜（尼康公司，日本）。
1.2 实验方法
1.2.1 细胞培养
HepG2细胞用含10%小牛血清的MEM培养基培养。将细胞接种于培养瓶中， 置于37 ℃、5% CO2，饱和湿度的孵箱中培养，2～3 d传代1次。
1.2.2 MTT法测细胞存活率
4×104 ml-1细胞100 μl 接种于96孔细胞培养板中培养24 h，加不同浓度AA处理24 h，弃去培养基，每孔加100 μl MTT（D?hank′s液溶解，浓度为1 g/L），37 ℃继续孵育4 h后，吸去培养液，每孔加DMSO 100 μl，待结晶物充分溶解，1 h后用酶标仪于570 nm处测光密度。结果用抑制率表示，计算公式如下：
抑制率＝对照组平均D570-给药组平均D570对照组平均D570-空白组平均D570×100%
1.2.3 MitoTracker染色检测线粒体数目
网
HepG2细胞经10，30，50 μmol/L AA处理24 h 后，用MitoTracker探针检测线粒体数目的变化，吸去培养孔中的培养基，加入37℃预温的含100 nmol/L MitoTracker的培养基100 μl，37℃孵育30 min。PBS洗2次，荧光酶标仪检测荧光强度（Ex588 nm/Em644 nm）。
1.2.4 JC?1染色测线粒体膜电位
4×103个HepG2细胞接种于 96 孔培养板中，以不同浓度AA作用于HepG2细胞24 h后，吸掉培养基,加入2.5 μg/ml的JC?1染料，37 ℃下避光孵育10 min，PBS洗2次，荧光酶标仪检测荧光强度（Ex488 nm/Em525，590 nm）。
1.2.5 ATP检测试剂盒测定胞内ATP水平
1.5×104个HepG2细胞接种于6 孔培养板中，以不同浓度AA作用24 h后，吸掉培养基，每孔加入200 μl裂解液裂解细胞。加100 μl ATP检测试剂到检测孔内，室温放置3～5 min后，再在检测孔内加上100 μl裂解细胞样品，迅速用***混匀，间隔2 s后，立即用化学发光酶标仪测定荧光强度。
1.2.6 DCFH?DA探针法检测胞内ROS含量
4×104 ml-1 HepG2细胞培养24 h，经不同浓度的AA处理24 h后，加入无血清培养基稀释的DCFH?DA溶液，使其终浓度为10 μmol/L，37 ℃下负载探针30 min，PBS洗2次。用荧光酶标仪检测荧光强度（Ex488 nm/Em525 nm），同时用荧光显微镜观察细胞的形态及荧光。
1.2.7 肝癌细胞VDAC基因检测
1.2.7.1 mRNA水平
反转录采用Invitrogen公司试剂盒说明书所述步骤；聚合酶链式反应(PCR)扩增反应体系：2.5 μl 10×缓冲液，1 μl dNTP，2 μl MgCl2，0.5 μl Taq DNA聚合酶，1 μl cDNA模板，1 μl 引物(VDAC)?A，1 μl 引物(VDAC)?S，1 μl 引物(β?肌动蛋白)?A，1 μl 引物(β?肌动蛋白)?S，13 μl 无菌水；引物序列为引物(VDAC)?S：5′?AGTGTGACGTTGACATCCGTA?3′，引物(VDAC)?A：5′ ?GCCAGAGCAGTAATCTCCTTCT?3′；引物(β?肌动蛋白?S: 5′?GGCTACGGCTTTGGCTTAAT?3′，引物(β?肌动蛋白)?A: 5′?CCCTCTTGTACCCTGTCTTGA?3′。反应先经过95 ℃ 2 min，然后是28个循环：94 ℃ 30 s，50 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，最后于72 ℃延伸反应4 min。PCR产物以1.5%琼脂糖凝胶电泳检测。
网
1.2.7.2 蛋白水平
采用蛋白质印迹法检测。提取各组细胞总蛋白，进行蛋白定量后，样品按比例加入3× SDS凝胶上样缓冲液溶解，煮沸5 min。以20 μg蛋白进行上样，电泳。50 V恒压4 h将蛋白转至PVDF膜；封闭液(1 g脱脂奶粉，0.2 g BSA溶于20 ml PBST溶液)封闭1 h；一抗孵育（抗VDAC抗体1∶2000；抗β?肌动蛋白抗体1∶5000）4 ℃过夜；PBST清洗5次，每次10 min；二抗孵育（1∶3000），室温1 h；PBST清洗5次，每次10 min；ECL发光液发光，暗室内X光片感光、显影、定影、观察。
1.2.8 统计方法
数据资料以±s表示，用SAS软件进行单因素方差分析（one way analysis of variance, ANOVA），组间比较进行q检查，显著性标准为α=0.05，所有实验重复3次。
2 结 果
2.1 AA抑制肿瘤细胞增殖
如***1所示，HepG2细胞经终浓度分别为20，30，40 μmol/L的AA溶液处理后，细胞生长受到抑制，细胞形态改变，如突起消失，胞体皱缩变圆等。
由***2 MTT结果发现, 与对照组比较，低浓度AA（20 μmol/L）组对HepG2细胞的生长没有明显影响；当剂量达到40 μmol/L 时，AA对HepG2细胞增殖有显著抑制作用，抑制率达78%，由此AA在HepG2细胞株上的IC50值为27 μmol/L。
2.2 AA对HepG2 细胞线粒体数量的影响
结果如***3所示，与对照组比较，10 μmol/L AA组细胞荧光强度增加了11%，30 μmol/L AA组细胞荧光强度增加了146%，50 μmol/L AA 组细胞荧光强度减少了44%，即线粒体数量随着AA浓度的升高，有一个先升高后降低的过程。
2.3 AA对HepG2细胞线粒体膜电位的影响
HepG2细胞经不同浓度AA处理24 h后，加JC?1荧光探针检测线粒体膜电位的变化，结果见***4。从***4b荧光照片可见：对照组线粒体全为红色，说明膜电位较高；经20 μmol/L 解耦联剂CCCP处理2 h只见绿色荧光，膜电位降低；经40 μmol/L AA处理24 h后的HepG2细胞线粒体呈草绿色或橙黄色荧光，说明线粒体膜电位发生不同程度地垮陷，线粒体功能受到影响。从***4a红/绿荧光强度比值分析直方***可知 30，40 μmol/L AA极显著地降低了HepG2细胞线粒体的膜电位。
2.4 AA对HepG2细胞线粒体功能的影响
由***5可知，与对照组比，HepG2细胞经不同浓度AA处理24 h后胞内ATP水平呈剂量依赖性地降低。胞内ROS含量呈剂量依赖性升高。
2.5 AA对HepG2细胞线粒体VDAC蛋白表达的影响
由***6a可看出，与对照组相比， 10，30，50 μmol/L AA对VDAC转录水平基本无影响，仅30 μmol/L AA处理组VDAC mRNA转录水平略有降低。由***6b可知以对照组VDAC与内参β?肌动蛋白免***条带灰度扫描的比值为100%，则10，30，50 μmol/L AA组分别为97%，187%，397%，说明AA 剂量依赖性地上调了VDAC蛋白的水平。
网
3 讨 论
我们在HepG2肿瘤细胞株上研究了AA的体外抗肿瘤作用，发现AA浓度依赖性抑制HepG2细胞株的增殖。这与之前的研究结果一致［4］。线粒体是调控细胞凋亡的关键因素，当线粒体受到药物毒性作用时，线粒体功能出现缺陷，线粒体数目增多可能是为了补偿这种缺陷而产生的反馈机制［8, 9］。因此30 μmol/L AA作用下线粒体数目增加，但膜电位明显降低，说明线粒体功能异常；当药物浓度继续增高时，线粒体损伤加重，反馈机制受到影响，线粒体的***不能正常进行［10］。50 μmol/L AA严重损伤线粒体，使之不能***，各种功能受损，线粒体数量大大减少。
AA通过诱导线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeably transition pore，mPTP）开放，导致线粒体膜电位垮陷，ATP水平下降，胞内ROS产量增多或清除率降低，最终诱导HepG2细胞死亡，可见AA可以通过线粒体介导通路诱导细胞死亡。
线粒体通透性转换孔mPTP由VDAC、腺嘌呤核苷酸易位子（adenine nucleotide translocator，ANT）、亲环蛋白D（cyclophilin D，Cyp D）等组成，是线粒体凋亡蛋白释放的主要通道。VDAC主要以两种方式调控线粒体介导的细胞死亡：一方面作为外膜上主要的蛋白孔道参与调控外膜的通透性，另一方面是与凋亡蛋白Bcl?2家族蛋白相互作用调控细胞凋亡。Yagoda等［11］指出VDAC可成为药物筛选的靶点。本实验室的研究表明，AA的保肝作用与逆转VDAC水平有关［2, 12］。实验结果表明，AA可以剂量依赖性诱导HepG2细胞线粒体VDAC蛋白表达量升高，AA的线粒体毒性很可能与VDAC有关。结合细胞内线粒体数目分析可以推断， 30 μmol/L AA作用时，HepG2细胞VDAC蛋白量的增加与线粒体数量增加有关；50 μmol/L AA作用时，HepG2细胞线粒体受到严重损伤，线粒体数目急剧减少，而VDAC蛋白孔道表达量显著增加，说明线粒体外膜VDAC蛋白形成的孔道增加。因此，AA的抗肿瘤作用与VDAC相关，但是其***粒体上的靶点是否就是VDAC，值得进一步探讨。
【参考文献】
［1］Gogvadze V, Orrenius S, Zhivotovsky B.Mitochondria as targets for cancer chemotherapy［J］.Semin Cancer Biol, 2009, 19(1): 57-66.
［2］Gao J, Tang X, Dou H, et al.Hepatoprotective activity of Terminalia catappa L.leaves and its two triterpenoids［J］.J Pharm Pharmacol 2004, 56(11): 1449-1455.
［3］杨光, 谭家驹, 何瑞华,等.积雪草酸阻断大鼠肝纤维化的实验研究［J］.中国中医基础医学杂志, 2009, 15(7): 540-542.
［4］林娜, 高静, 方春钱,等.积雪草酸与化疗药物联用抗肿瘤效应的初步研究［J］.江苏大学学报：医学版, 2008, 18(6): 494-497.
［5］Lee MK, Kim SR, Sung SH, et al.Asiatic acid derivatives protect cultured cortical neurons from glutamate?induced excitotoxicity［J］.Res Commun Mol Pathol Pharmacol, 2000, 108(1-2): 75-86.
［6］Park BC, Bosire KO, Lee ES, et al.Asiatic acid induces apoptosis in SK?MEL?2 human melanoma cells［J］.Cancer Lett, 2005, 218(1): 81-90.
［7］Tang XL, Yang XY, Jung HJ, et al.Asiatic acid induces colon cancer cell growth inhibition and apoptosis through mitochondrial death cascade［J］.Biol Pharm Bull, 2009, 32(8): 1399-1405.
网
［8］Nugent ***, Mothersill CE, Seymour C, et al.Increased mitochondrial mass in cells with functionally compromised mitochondria after exposure to both direct gamma radiation and bystander factors［J］.Radiat Res, 2007, 168(1): 134-142.
［9］Xia SL, Laterra J.Hepatocyte growth factor increases mitochondrial mass in glioblastoma cells［J］.Biochem Biophys Res Commun, 2006, 345(4): 1358-1364.
［10］Li F, Wang Y, Zeller KI, et al.Myc stimulates nuclearly encoded mitochondrial genes and mitochondrial biogenesis［J］.Mol Cell Biol, 2005, 25(14): 6225-6234.
雪的作用篇7
关键词：积雪草苷；药理作用；作用机制；研究进展
中***分类号：R285
文献标识码：A 文章编号：1673－7717(2008)01－0215－04
积雪草(Centella asiatica)为伞形科积雪草属植物，作为传统药用植物在我国有着悠久的历史以及广泛的应用，成分多为三萜类化合物，其中积雪草苷(asiatieoside，AT)以其药理活性丰富，临床作用广泛，成为积雪草中的主要活性成分，应用前景大，极具有开发价值。近年来，大量的研究证实AT具有抗肿瘤、抗静脉机能不全、抗溃疡、促创伤愈合、抗抑郁以及恢复神经功能等多种药理活性，同时还显现出在心血管、免***调节、抗炎、抗病毒等方面的药理作用。本文就近年来对AT进行的丰富药理作用及其作用机制研究进行了综述。
1 抗肿瘤作用
肿瘤是现代人类生命和生活质量的一大杀手，研究证明AT对多种癌细胞都有明显的药理作用，且机制多样。
1.1 抑制肿瘤细胞异常增殖并且协同增强长春新碱等抗肿瘤药物的活性MTT法测定AT对几种癌细胞株增殖抑制作用的研究结果显示，在亚细胞毒性浓度下，AT使B细胞淋巴瘤磷酸化水平高于正常细胞，因而对肿瘤细胞的增殖呈抑制性效果，专一性很强，并且在这一抑制过程中，出现一种新的活性细胞蛋白酶，说明其中很可能存在着一种全新的抑制机制。AT和长春新碱联合用药表现出了强烈的协同效应，联合用药所产生的抗肿瘤效果比单纯使用长春新碱或AT的作用都强。
1.2 诱导癌细胞凋亡发挥抗肿瘤作用 研究发现，AT能够降低人黑色素瘤细胞SK－MEL－2成活力，能在特定时期和特定计量下诱导其凋亡。同时，AT能明显增加细胞内活性氧浓度，提高Bax在细胞内的表达，以剂量依赖性的方式诱导激活细胞凋亡蛋白酶活性。值得注意的是，AT并不提高存在于SK－MEL－2细胞突变体中的p53核内蛋白的水平。这些结果表明，AT诱导细胞死亡是通过ROS增殖介导的，改变Bax/Bcl－2的比例和半胱天冬酶的活性，并不依赖p－53，在人类皮肤癌临床***中显示了良好的前景。
1.3 阻断肿瘤细胞DNA合成以发挥抗肿瘤作用 AT对氧化偶氮甲烷诱导产生的变体小囊病灶(ACF)和F344雄性小鼠肠肿瘤的抑制作用机制研究表明，大肠癌早期ACF的数量显著降低，而甲基化的DNA加和物浓度没有降低，而在之后一阶段，伴随着ACF的降低，5－溴代－2－脱氧尿苷标记物也降低并且增加了结肠黏膜细胞的凋亡。在一次性给予AT(10mg/kg体重)的情况下。小肠腺癌的新生细胞的发病率和新生肿瘤的尺寸比单独给予氧化偶氮甲烷要小，且具有显著性的差异(P
AT丰富的抗肿瘤药理作用及其机制随着研究的深入，越来越显示出一条新颖的途径，相信随着研究的深入，会有更加可喜的前景。
2 抗静脉机能不全
慢性静脉功能不全(CVI)是静脉血流量不足导致的常见疾病，通常发生在下肢，可引起多种不适，如下肢疼痛、瘙痒、疲劳且患者还经常伴有浮肿和溃疡。AT对慢性静脉功能不全有明显的***效果。口服10－15天后，浮肿的现象就有了明显改善，下肢肿胀感、沉重感、痉挛、疼痛、下肢肿胀和皮肤色素沉着及溃疡形成等其他一些临床症状也获得了好转，且副作用很轻微，安全有效。口服给与AT还能改善微循环，疏通毛细血管，降低血管紧张度，强化血管周围结缔组织，延长病发时间，缓解疼痛以及减少静脉曲张和痔疮的合并症。经药理学实验表明，通过改善微循环系统，高血压和静脉微血管病症状能够得到明显的改善，并且没有发现副作用。为了进一步研究AT在改善糖尿病性微血管病的微循环缺陷方面的机制，Incandela等设计了一组对照实验。将患者分为兼患有糖尿病性微血管病并伴有神经病变和水肿的；只患有微血管病而没有神经病变的；以及健康受试者，并随机分成***组和对照组，以多普勒激光和毛细管滤过作用为指标。***组给予AT，对照组服用相似的片剂。***过程中耐药性良好，无副作用。在患有神经病变的两组，观测到RF和RAS值显著性降低(P
3 抗溃疡作用
不同剂量的AT(5－10mg/kg体重)灌胃给与醋酸诱导的胃溃疡小鼠药理模型的追踪性研究表明，AT在***胃溃疡过程中对诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和活性起抑制性作用，在第3、7天发现溃疡面不断减小，并伴有在溃疡组织髓过氧化物酶活性降低，同时还能促进上皮细胞增殖和血管的生成。基本的成纤维细胞生长因子的表达，是一个重要的血管生成的因素，也在AT的***下得到了正调节。这些结果进一步证明了AT的抗溃疡作用。离体胃腔模型的胃跨膜电位差(PD)在应用50％乙醇刺激后降低，而AT能促进胃黏膜的恢复。在给予酒精之前，灌胃给药AT就能够明显抑制胃黏膜损伤的发生(减少58％－82％)并且剂量依赖性地降低胃黏膜髓过氧化物酶(MPO)活性。这些结果表明，AT能通过加强胃黏膜屏障作用以及降低自由基损伤效应来防治胃溃疡。目前的研究结论显示，AT对由于酒精、阿斯匹林、冷刺激、压力和幽门结扎引起的胃溃疡都有疗效。口服给药每天两次，每次200～ 600mg/kg体重，共5天，效果明显优于硫糖铝(相同剂量)，其对胃酸蛋白分泌作用较小，但大剂量能显著增加胃液黏蛋白分泌和黏膜细胞糖蛋白，减少胃壁细胞脱落，强化黏膜
屏障。中国和印度广泛在临床上应用AT于胃溃疡***，具有很广阔的现实意义。
4 促创伤愈合作用
以AT逐步增加剂量法(TECA)***创伤在欧洲已经有几百年的历史了。试验显示，用不锈钢插入小鼠皮下造成伤口，连续注射AT，在第7、14、2l、28天收集其创伤处细胞进行生物化学检查或者是组织学检查，结果表明，细胞干重、DNA表达、总蛋白质，胶原质和糖醛酸含量都有增加。AT能够以低剂量刺激胶原化合物生长，对葡萄糖胺聚糖生长也有促进作用，通过诱导细胞周期加快，促进人类真皮成纤维细胞中胶原组织的生成。AT对创伤的疗效引发了对其在分子和基因表达水平上的作用机制的研究：cDNA微点阵技术研究表明，在离体培养下给予30μg/mL，人类真皮成纤维细胞的基因表达外形的改变具有显著性，基因外形、mRNA、蛋白质产生都有明显的相关性，而且细胞抗氧化水平的提高，也能促进胶原组织和血管的生成。目前的研究显示AT能够在***的最初时期诱导增加抗氧化物的含量，这是其在***过程中起作用的重要原因。
5 抗抑郁作用
研究表明AT作为积雪草中最主要的抗焦虑活性药效物质，还有值得深入研究的方面。为了研究其抗抑郁作用机制，将小鼠随机的分成对照组、模型组和***组，灌胃给与不同剂量的AT，在固定时间通过强制性游泳耐力实验，用荧光光谱测量血清中的肾上腺酮水平，用电化学监测器HPLC进行测定单胺类神经递质的含量及其在大脑皮层的－代谢产物等。结果显示，积雪草苷显著地降低了血清中肾上腺酮的水平，而增加了5－HT、NE以及DA的含量。在小鼠的大脑中均监测到了它们的代谢产物5－HIAA以及MHPG的增量表达。从中，可以得出一定的结论：AT的抗抑郁作用是基于HPA的功能以及增加了单胺类神经递质的含量，5－HT失调性的降低，进一步证实了AT的抗抑郁活性。
6 恢复神经功能
在印度草药医学中。AT早已经被用作神经滋补品服用。口服可以加速神经再生，有体外增加轴突伸长的作用。轴突的再生对于受损的神经功能的恢复有至关重要的作用。据研究显示，在神经细胞生长因子存在下，AT在100mg/kg体重时，就能引出人SH－SYSY细胞轴突显著增长。在雄性Wistar大鼠的饮水中加入AT(每天300～330mg/kg)，与对照组相比证明轴突生长加速而且功能得到迅速恢复。这一显著性的作用必将能为临床提供很有意义的指导。
7 其它药理功能
7.1 心血管方面的作用 ①增强心肌氧化应激作用：阿霉素进行多重***时容易导致心肌病和充血性心力衰竭，通过口服灌胃给与AT能显著增加氧化应激和缺乏抗氧化作用，能起到显著地改善作用。研究表明，在阿霉素2.5mg/kg体重给药而造成的小鼠心肌缺血性损伤药理模型中。灌胃AT(200 mg/kg体重)就可对心肌起明显的保护作用，血浆中的标识酶(***酸脱氢酶、肌酸磷酸激酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶)在抗氧化物酶的上较阿霉素引发的损伤模型具有显著性差异(P
7.2 免***调节功能 人外周血单核细胞(PBMCs)培养模型中，AT能够明显的增加IL－2和TNF－alpha的生成，用AT(100mg/kg体重)处理的BALB/c小鼠对初级和次级BSA都表现出较高的应答反应。目前的研究显示AT的免***调节活性与非特异细胞和体液免***反应相关。在5种剂量下，碳清除法、抗体滴定法和环磷酰胺免***抑制法实验结果均显示。AT可以显著增加吞噬细胞指数和白细胞数目，呈现剂量依赖性。
7.3 抗炎作用 活性巨嗜细胞产生的一氧化氮(NO)在炎症过程和抗炎过程中都起着重要作用。研究表明AT主要通过抑制肿瘤坏死因子，从而显著性降低巨噬细胞所产生的一氧化氮(NO)，以致炎症的恶化，促进组织细胞形态学生的改善以及器官恢复。
雪的作用篇8
关键词： 雪灵芝； 镇痛； 机制
雪灵芝系石竹科蚤缀属植物(Arenaria. spp)，多年生垫状草本，分布于青藏高原海拔约5000 m左右的永久雪线附近地带。《藏药志》记述雪灵芝性味功用“苦寒，清肺中之热，止咳，降血压，滋补；治肺炎、淋病、淋巴结核、子宫病”。
彭宝珠等［1～3］对雪灵芝的药理药效学进行了研究。试验证明，雪灵芝提取物有抗炎、抗免***、解热镇痛、镇咳祛痰、抗乌头碱引起的心律失常作用、抗缺氧和降血压作用,对酒精性肝损伤具有明显的保护作用，并能够增强免***功能，对肿瘤具有抑制作用。雪灵芝是一种能提高综合免***能力的传统药物，其药用价值有进一步研究的必要。
研究表明［4］，蚤缀中含有氨基酸、糖类、生物碱、黄酮苷、皂苷及香豆素等多种成分。本研究对雪灵芝的提取物进行了分离，得到了镇痛有效部位，利用分光光度法对两个部位进行了总黄酮含量的测定,并其镇痛作用进行了研究。
1 材料
1.1 药物与试剂阿司匹林，罗痛定注射液(广东省博罗先锋药业集团有限公司,批号:070904)，罗痛定片(成都市湔江制药厂,070603)；芦丁对照品（南京替斯艾么中药技术研究所，批号：TCM027-080118）；亚硝酸钠、氯化铝、乙醇、冰醋酸、氢氧化钠均为普通市售分析纯试剂；雪灵芝采自西藏自治区。
1.2 动物昆明种小鼠，雌雄不论，体质量18～22 g，洁净级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证号：2005A033号。
2 方法
2.1 分光光度法测定总黄酮含量［5］雪灵芝药材采自西藏自治区，经广西植物研究所高级工程师黄定中鉴定为雪灵芝Arenaria kansuensis Maxim。雪灵芝全草用水提取，水提液上D101大孔树脂，以蒸馏水洗脱至无色；以30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得C012；60%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得C013。
精确称取20.0 mg芦丁对照品，以60%乙醇溶液超声溶解并定容至100 ml，分别移取上述芦丁储备液0，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00 ml于7个25 ml量瓶中，加入0.50 mol/L的亚硝酸钠溶液1.0 ml，摇匀静置5 min后，加入0.30 mol/L氯化铝溶液1.00 ml，摇匀静置5 min后，加入1.00 mol/L氢氧化钠溶液5.0 ml，用60%乙醇水溶液定容至刻度。取芦丁溶液在波长360～600 nm区间扫描，确定最大吸收波长为505 nm。取不同浓度芦丁溶液于波长505 nm处比色测定吸光值，试剂空白参比，绘制标准曲线，线性回归分析得标准回归方程：A=2.353 5C-0.0371 2，回归系数r=0.993 3。
分别精密称取样品C012：0.300 5 g，样品C013：0.300 9 g，用60%乙醇溶解并定容到50 ml的容量瓶中，再各取两样品溶液2 ml于50 ml的容量瓶中，定容。参照上述方法，吸取标准品溶液或样品溶液，进行精密度、稳定性、重现性和回收率实验［6］。
2.2 镇痛实验方法［7］
2.2.1 热板法
雌性小鼠，放在(55±0.5)℃的金属热板上，挑选痛阈值在5～30 s的小鼠，根据痛阈值随机分生理盐水组、阳性药物组和测试药物高、中、低剂量组，每组10只，各组均ig给药（0.2 ml/10 g），1次/d，连续7 d。末次给药后不同时间分别再测痛阈,以药后痛阈的提高值为指标，进行组间比较。
2.2.2 对醋酸引起的小鼠扭体镇痛实验取昆明种小鼠80只，随机分成8组，即生理盐水组，阿司匹林组（200 mg/kg），C012高、中、低剂量组（200，100，50 mg/kg），C013高、中、低剂量组（200，100，50 mg/kg），每组10只。连续灌胃给药7 d，2次/d，每次0.2 ml/10g。最后一次灌胃后1 h，给各组小鼠腹腔注射0.5%乙酸溶液0.2 ml/只。然后以腹部内陷、四肢伸展及臀部抬高为疼痛反应指标，观察15 min内出现扭体反应的次数，计算镇痛率。
镇痛率（%）=［(模型组扭体次数-给药组扭体次数)／模型组扭体次数］×100％药效学实验数据以±s表示，采用SPSS统计软件进行统计学处理。
3 结果
3.1 精密度准确吸取标准品溶液1 ml，分别置于5只10 ml容量瓶中，按照标准曲线项下操作，测定吸光度，计算RSD为0.25%，精密度良好。
3.2 稳定性准确吸取标准品溶液1 ml置丁10 ml容量瓶中，按照标准曲线项下操作，测定10，20，30，40，50 min时吸光度，求得RSD为1.58%，稳定性良好。
3.3 重复性取样品C012溶液5份，在操作条件下测定各自的总黄酮含量，求得RSD为0.71%，重复性良好。
3.4 加入回收率实验量取样品溶液3份，加入不同量的芦丁对照品溶液，按实验方法进行显色，测定吸光度，计算回收率，回收率在96%～101%之间。
雪的作用篇9
1、可消暑解渴、开胃消食、排毒瘦身。
2、饮食要规律，一日三餐，定时定量，饮食要清淡，多吃西红柿、苹果，胡萝卜等蔬菜水果，以提高身体抗炎能力。蛋糕、汽水、 咖啡等少食；少吃纯热量食物；忌辛辣刺激调味品；控制刺激物的摄入；避免咖啡、汽水 等；如辣椒、咖哩粉等少食。
（来源：文章屋网 ）
雪的作用篇10
【关键词】除雪车、前雪铲、结构设计、犁形雪铲。
中***分类号：TB482文献标识码： A
除雪车是用于清除路面冰雪，保障交通工具和行人安全的专用机械。除雪工作的开展，对生产、交通、生活、安全等各个方面都有着十分关键的意义，而机械化是公共交通作业的发展方向，因此做好多功能型除雪车的性能开发完善，是适应时代的需要。
1.前雪铲概念及参数
1．1前雪铲概念及安装
前雪铲是除雪车主要除雪装置，通常为单板或双板犁式雪铲，安装在除雪车底盘前段，可根据除雪车的多功能需要进行安装和拆除。***1-1为除雪车前雪铲安装示意***。
前雪铲铲体通常为曲面铲板，由铲轴和调节器等配件铰接在铲臂上，铲臂与车架连接，车架下部设有液压装置，铲臂支架与液压装置连接。这种结构的设置使前雪铲由液压控制，可以左右偏转，升降，并可快速装卸，以适应车辆的多样化用途。
***11 除雪车前铲工作示意***
1.2前雪铲铲板曲面
常见的前雪铲铲板曲面形状有圆弧型、抛物线型、渐开线型等几种，利用除雪车高速推进的动力，可使路面各种形式的积雪和冰雪混合物，沿着曲面进行旋移飞出达到清理路面积雪的目的。前雪铲铲板的曲面形状和参数关系到除雪车的工作效率，其设计是前雪铲设计的核心内容。前雪铲各部分名称如***1-2所示。
***1-2
1-推雪铲；2-拉簧；3-推雪铲上连杆；4-前托架；5-后托架；6-举臂连杆；7-大梁托架；8-举臂架；9-升降油缸；10-摆动油缸；11-推雪铲下连杆。
1.3前雪铲铲板相关参数
1.3.1除雪宽度
除雪宽度是指除雪车在工作中，在单向行进方向上单次清除积雪的宽度，也就是除雪铲在除雪工作单次作业的最小投影宽度。其除雪宽度的要求根据除雪车使用场合的不同有不同的规格要求。比较空旷的场所如广场、运动场、机场等面积较大、地势平稳、地形简单的场所，除雪车需要较大的除雪宽度保证单次能够完成较大的除雪量；在受限空间中作业的除雪车除雪宽度要考虑受限空间的不同情况来选择合理的除雪宽度，在公路上除雪车的除雪宽度要考虑到车辆通行的便利，防止在除雪作业的时候造成车辆通过困难，从而造成交通阻碍。此外前雪铲铲板的除雪宽度跟除雪车的车型尺寸也有很大的关系，除雪宽度过大于车辆轮胎外径，会因铲体重量过大增加前轮负荷，影响除雪车行驶稳定性；除雪宽度窄于车辆轮胎外侧，会造成积雪被轮胎碾压板结，影响除雪效果。一般是前端应比同侧轮胎外缘宽出200mm，后端应比同侧轮胎外缘宽出400mm。
1.3.2切削角
切削角是前雪铲在除雪车行进方向上铲体与地面间的夹角，其大小直接影响除雪前进阻力的大小。随着除雪车的前进，具有一定切削角的铲刃在垂直力的作用下，将积雪剥离其附着面，积雪沿导板曲面向斜上方运动，最后以一定的速度从推雪铲后端部排出。具有一定黏性的雪在切削角较小时呈流动型，在切削角大时呈断裂型。切削角太小使切削刃变薄、强度不足；但切削角过大，切削阻力会显著增大。在实际应用中，前雪铲在清除路面积雪和冰水混合物时，切削角度数在20度至30度范围内取值比较理想。
1.3.3行进角
指前雪铲铲体横向方向与车辆行进方向所夹锐角。行进角与除雪阻力、排雪性能、推雪铲长度都有很大关系，行进角小，则除雪阻力小，且排雪性能好，但须有较长的铲体才能保证必需的除雪宽度；行进角大，铲体长度则可短些，但除雪阻力增大，排雪性能也将变差。根据实际使用经验，前雪铲行进角一般取值在50度～60度之间。
2.前雪铲铲板曲面结构参数确定
2.1推雪铲材料
推雪铲的主要工作部分是切削刃和与其联接在一起的铲板。切削刃是直接切雪的零件，应有足够的耐磨性、强度、和刚度。切削刃是易损件，因此它与铲板之间设计为可拆分段联接。适宜的铲体自重利于增大铲体作用于路面的线压力，因此除雪车并不刻意追求降低前铲的总质量，但必须考虑行车稳定性和所用载重车前后轴的承荷能力。通常情况下除雪车前铲推雪铲的质量限制在500～800kg。材质选择时兼顾经济性，除连接零件外，大部分零件材质选择Q235钢。选取切削刃材料时除考虑耐磨性、韧性、经济性等因素外，须考虑工作温度对其物理特性的影响，一般选取65Mn调质钢。
2.2推雪铲切削刃参数选取
切削刃和与其联接在一起的铲板是推雪铲的主要工作部分。为了设计性能良好的推雪铲，必须对切削刃和铲板加以分析和认识。除雪车前雪铲主要应用于清除新降积雪，新降雪的密度随其结构、气象条件以及降雪气温的不同而变化，其密度值一般在20～800kg/m3之间。除雪车的前铲切削对象是新降积雪，同时除雪车为保护路面大多采用轮式行走机构，所能提供的最大牵引力较履带式行走机构小，而且工作速度要求较高，所以应尽量减小工作时的切削阻力。除雪车的工作路面较为平整，适应地形变化需要的后角可略小。因此综合考虑，推雪铲前铲铲刃切削角选择为30°，并对其结构作相应调整，切削刃厚度取8mm左右即可。
2.3前铲的铲板空间形状设计
前铲的作业对象是密度较小、颗粒间结合松散的积雪，它采用高速推进曲面旋移的理论进行除雪（除雪车前铲作业速度为30km/h左右）。在高速犁板上，被除雪粒不会堆积成堆，而是紧贴犁板，做空间旋移运动。推雪铲铲板曲面空间形状直接影响被除颗粒的空间旋移轨迹，是除雪阻力、除雪效率等的重要影响因素。为了便于向道路外侧排雪，推雪铲常设计成一端小一端大，以固定的行进角（铲板长度方向与车辆行进方向所夹的锐角）工作,被除雪屑的理想运动轨迹是空间螺旋外抛运动。
结束语
综上所述，多功能除雪车犁形前雪铲除雪的结构设计，应该要满足一下几个条件：
（1）犁形前雪铲曲面形式达到设计要求，各种非硬化积雪在铲面上无堆积，扬雪角度低、扬雪距离大、分散小，飞雪对驾驶员的视野影响小。
（2）犁形前雪铲水平摆动、垂直升降运动灵活可靠，除雪作业时可随机调整犁形前雪铲的前进角和铲刃离地间隙，保证最大除雪作业效率和最佳除雪作业质量。
（3）犁形前雪铲总体结构紧凑，强度、刚度达到设计要求。
（4）犁形前雪铲拆装简单方便，短时间内即可实现自卸车和除雪车功能间的转换。
【参考文献】
[1]张建国.多功能除雪车前雪铲仿真分析与改进研究[A].硕士学位论文.